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- 详细信息
- 技术资料
- 细胞类型:
人细胞系
- 供应商:
上海邦景
- 库存:
28
- 生长状态:
贴壁生长
- 是否是肿瘤细胞:
是
- 物种来源:
人
- 规格:
1×10^6cells
细胞系具有易培养、品类多、价格便宜、无限传代等优点,也非常容易在培养、冻存中发生错误鉴定及交叉污染的问题。
细胞系的实验步骤:
一、实验前准备工作
1、提前24h取12mL DMEM(abs9483)和RPMI 1640(abs9484)完全培养基(含10%FBS(abs972),下同)于50mL离心管内,置于4℃冰箱中预冷;
2、将分装好的Matrigel基质胶(abs9490)提前24h从-20℃放入4℃,使其融化成液体状态;
3、将无菌的1mL移液器枪头放入无菌50mL离心管内,置-20℃冰箱预冷。
二、琼脂糖包被96孔板
1、准确量取6mL RPMI 1640培养基(或DMEM培养基)于2个10mL的注射玻璃瓶内,加入90mg琼脂糖(abs44056213),盖塞后放入80℃的水浴锅内加热溶解30min;
2、加热结束后,将注射瓶放入灭菌锅内,115℃灭菌30min;
3、灭菌完成后,迅速取出注射瓶放入超净台内。将注射瓶内的琼脂糖溶液倒入无菌的加样槽中,用多通道移液器以每孔60μL的量加入96孔板内。注意:由于琼脂糖溶液在室温时会凝固,因此从灭菌锅内取出琼脂糖溶液后
一定要快速转移至超净台内并迅速加入至96孔板中。此外,为保证加样时琼脂糖不冷却,需要同时灭菌加样槽和100μL的移液器枪头。
4、加入完成后,96孔板要保持水平约30min使孔内的琼脂糖凝固。
选择培养基没有一定的标准:
(1)建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞的培养基。可以查阅参考文献,或在购买细胞株时咨询。
(2) 其它实验室惯用的培养基不妨一试,许多培养基可以适合多种细胞。
(3) 根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选 RPMI1640
(4)用多种培养基培养目的细胞,观察其生长状态,可以用生长曲线、集落形成率等指标判断,根据实验结果选择最佳培养基,这是最客观的方法,但比较繁琐。
如何正确地使用细胞系?
首先做好细胞系的保存,尽量多的保存早期分裂增殖的细胞系。因为随着传代次数增多,细胞系的稳定性下降,遗传物质,细胞形态,倍增时间等都可能发生改变。其次,熟悉所用细胞系的增殖和生长特点,熟悉它对营养物质的需求。比如,倍增时间,培养液需求特征,血清浓度要求等等。最后,定期做好细胞系鉴定工作,尤其是从外部借来使用的细胞系,要求其遗传谱图与细胞库中的一致。这点关系到你研究研究结果的可靠性和可重复性。
细胞系的用途有哪些?
1、科学研究:药物研究开发与基础研究药物研究与开发
(1)新药筛选:如化学合成药物药效研究、中药有效成分筛选与鉴定等。
(2)疫苗研究与开发:如病毒性疫苗的研究与开发(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等)、肿瘤疫苗(多肽疫苗)等。
(3)基因工程药物研究与开发:如干扰素研究与开发,细胞生长因子研究与开发等。
(4)细胞工程药物研究与开发:生物活性多肽研究与开发,人参皂甙、紫杉醇等生物活性成分研究与开发。
(5)单克隆抗体制备:包括诊断用单克隆抗体,治疗用单克隆抗体。
基础研究
(1)药物作用机理
(2)基因功能
(3)疾病发生机理
2、生物制药
(1)疫苗生产:如病毒性疫苗(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等)、肿瘤疫苗(多肽疫苗)等。
(2)基因工程药物生产:如在临床医学中具有治疗价值的一些细胞生长因子如干扰素、粒细胞生长因子、胸腺肽等。
(3)诊断用和药用单克隆抗体生产。
(4)细胞工程药物生产:生物细胞内的一些生物活性多肽,生物活性物质等。
下列是公司正在出售的产品:
Frizzled 10/CD350: CD350抗体 小鼠腹脊髓神经细胞(MN-vsc)(1×106)
人支气管上皮细胞RNAHBEpiC miRNA5 μg 兔Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA 试剂盒 Goat Anti-Guinea IgG/PE-Cy7 PE-Cy7标记的羊抗豚鼠IgG 0.1ml
Frizzled 4: CD344抗体 杂交瘤(B类);Z51B3C10H12A12G2F7E7 小鼠皮下脂肪细胞完全培养基 100mL
TNFSF11 Others Human 人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 人细胞裂解液 (阳性对照) 兔8-异构前列腺素(8-epi-PGF2α)ELISA 试剂盒 Goat Anti-Guinea IgG/RBITC 罗丹明标记的羊抗豚鼠IgG 0.3ml
Frizzled 6: 卷曲蛋白6抗体 人主动脉内皮细胞总RNAHAEC NA
phospho-MAP3K9+MAP3K10(Thr312 + Thr266): 0酸化原活化蛋白激酶3K9抗体 HO-8910PM细胞,高转移卵巢癌细胞 人胃粘膜细胞,GES-1细胞 狗肺成纤维样细胞;DogL1
PROCR Others Human 人 Epcr / PROCR 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠脱氢表雄酮酯(DHEA-S)ELISA 试剂盒 Alpha1-MG(Mouse Alpha1-microglobulin) 小鼠α1微球蛋白 96T
TYRO3: 受体酪酸激酶抗体 人肺动脉成纤维细胞裂解物HPAFL
BNL CL.2小鼠胚胎肝细胞 BNL CL.2 mouse embryo liver cells DMEM培养基+10%FBS 大鼠脱氢表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA试剂盒 MCP-4/CCL13(Mouse monocyte chemotactic protein 4) 小鼠单核细胞趋化蛋白4 96T
MAP3K9: 原活化蛋白激酶3K9抗体 HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Indonesia/5/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照)
NCI-H1781细胞THP-1 人单核细胞白血病细胞 大鼠促甲状腺素释放激素(H)ELISA试剂盒 ODF(Human osteoclast differentiation factor) 人破骨细胞分化因子 96T
RNF6: 环指蛋白6抗体 Ec109细胞,食管癌细胞 人卵巢癌细胞,COC1细胞 人脉络丛内皮细胞cDNAHCPEC cDNA
CXCL12 Others Cynomolgus 食蟹猴 CXCL12 / SDF-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠促甲状腺素释放激素(H)ELISA 试剂盒 OH-PYD(Human Hydroxy-Pyridinium crosslinks) 人羟基胶原交联 96T
Ribonuclease 6: 核糖核酸酶6抗体 中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS5A
CL-0418QGY-7703(人肝癌细胞)5×106cells/瓶×2 大鼠促甲状腺素(TSH)ELISA试剂盒 DPD(Human Deoxypyridinoline crosslinks) 人脱氧胶原交联 96T
GGT1 Others Rat 大鼠 GGT1 人细胞裂解液 (阳性对照) 人表皮生长因子(EGF)ELISA 试剂盒 ASK1/MAPKKK5 细胞凋亡信号调节激酶1/原活化蛋白激酶激酶激酶5抗原 0.5mg
Phospho(Tyr986 + Tyr987): 0酸化肌醇聚0酸盐0酸酶样蛋白1抗体 CM-R015大鼠胰岛细胞完全培养基100mL
M1细胞,小鼠白血病细胞 脆弱拟杆菌 新生牛眼Tenon's囊成纤维细胞;NBTF 人表皮角蛋白(EK)ELISA 试剂盒 Maspin (mammary serine protease inhibitor) 抑癌基因抗原 0.5mg
Inhibin Beta C: 抑制素βC抗体 ICAM3 Others Human 人 CD50 / ICAM3 人细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠胚胎成纤维细胞(来自NIH3T3);PA12 人表面膜免疫球蛋白M(mIgM)ELISA 试剂盒 Matriptase 蛋白裂解酶(一种新的癌基因)抗原 0.5mg
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| NCI-H1781细胞 | 1×10^6cells | BJ-X6397 |
一、实验前准备工作
1、提前24h取12mL DMEM(abs9483)和RPMI 1640(abs9484)完全培养基(含10%FBS(abs972),下同)于50mL离心管内,置于4℃冰箱中预冷;
2、将分装好的Matrigel基质胶(abs9490)提前24h从-20℃放入4℃,使其融化成液体状态;
3、将无菌的1mL移液器枪头放入无菌50mL离心管内,置-20℃冰箱预冷。
二、琼脂糖包被96孔板
1、准确量取6mL RPMI 1640培养基(或DMEM培养基)于2个10mL的注射玻璃瓶内,加入90mg琼脂糖(abs44056213),盖塞后放入80℃的水浴锅内加热溶解30min;
2、加热结束后,将注射瓶放入灭菌锅内,115℃灭菌30min;
3、灭菌完成后,迅速取出注射瓶放入超净台内。将注射瓶内的琼脂糖溶液倒入无菌的加样槽中,用多通道移液器以每孔60μL的量加入96孔板内。注意:由于琼脂糖溶液在室温时会凝固,因此从灭菌锅内取出琼脂糖溶液后
一定要快速转移至超净台内并迅速加入至96孔板中。此外,为保证加样时琼脂糖不冷却,需要同时灭菌加样槽和100μL的移液器枪头。
4、加入完成后,96孔板要保持水平约30min使孔内的琼脂糖凝固。
选择培养基没有一定的标准:
(1)建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞的培养基。可以查阅参考文献,或在购买细胞株时咨询。
(2) 其它实验室惯用的培养基不妨一试,许多培养基可以适合多种细胞。
(3) 根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选 RPMI1640
(4)用多种培养基培养目的细胞,观察其生长状态,可以用生长曲线、集落形成率等指标判断,根据实验结果选择最佳培养基,这是最客观的方法,但比较繁琐。
如何正确地使用细胞系?
首先做好细胞系的保存,尽量多的保存早期分裂增殖的细胞系。因为随着传代次数增多,细胞系的稳定性下降,遗传物质,细胞形态,倍增时间等都可能发生改变。其次,熟悉所用细胞系的增殖和生长特点,熟悉它对营养物质的需求。比如,倍增时间,培养液需求特征,血清浓度要求等等。最后,定期做好细胞系鉴定工作,尤其是从外部借来使用的细胞系,要求其遗传谱图与细胞库中的一致。这点关系到你研究研究结果的可靠性和可重复性。
细胞系的用途有哪些?
1、科学研究:药物研究开发与基础研究药物研究与开发
(1)新药筛选:如化学合成药物药效研究、中药有效成分筛选与鉴定等。
(2)疫苗研究与开发:如病毒性疫苗的研究与开发(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等)、肿瘤疫苗(多肽疫苗)等。
(3)基因工程药物研究与开发:如干扰素研究与开发,细胞生长因子研究与开发等。
(4)细胞工程药物研究与开发:生物活性多肽研究与开发,人参皂甙、紫杉醇等生物活性成分研究与开发。
(5)单克隆抗体制备:包括诊断用单克隆抗体,治疗用单克隆抗体。
基础研究
(1)药物作用机理
(2)基因功能
(3)疾病发生机理
2、生物制药
(1)疫苗生产:如病毒性疫苗(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等)、肿瘤疫苗(多肽疫苗)等。
(2)基因工程药物生产:如在临床医学中具有治疗价值的一些细胞生长因子如干扰素、粒细胞生长因子、胸腺肽等。
(3)诊断用和药用单克隆抗体生产。
(4)细胞工程药物生产:生物细胞内的一些生物活性多肽,生物活性物质等。
下列是公司正在出售的产品:
Frizzled 10/CD350: CD350抗体 小鼠腹脊髓神经细胞(MN-vsc)(1×106)
人支气管上皮细胞RNAHBEpiC miRNA5 μg 兔Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA 试剂盒 Goat Anti-Guinea IgG/PE-Cy7 PE-Cy7标记的羊抗豚鼠IgG 0.1ml
Frizzled 4: CD344抗体 杂交瘤(B类);Z51B3C10H12A12G2F7E7 小鼠皮下脂肪细胞完全培养基 100mL
TNFSF11 Others Human 人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 人细胞裂解液 (阳性对照) 兔8-异构前列腺素(8-epi-PGF2α)ELISA 试剂盒 Goat Anti-Guinea IgG/RBITC 罗丹明标记的羊抗豚鼠IgG 0.3ml
Frizzled 6: 卷曲蛋白6抗体 人主动脉内皮细胞总RNAHAEC NA
phospho-MAP3K9+MAP3K10(Thr312 + Thr266): 0酸化原活化蛋白激酶3K9抗体 HO-8910PM细胞,高转移卵巢癌细胞 人胃粘膜细胞,GES-1细胞 狗肺成纤维样细胞;DogL1
PROCR Others Human 人 Epcr / PROCR 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠脱氢表雄酮酯(DHEA-S)ELISA 试剂盒 Alpha1-MG(Mouse Alpha1-microglobulin) 小鼠α1微球蛋白 96T
TYRO3: 受体酪酸激酶抗体 人肺动脉成纤维细胞裂解物HPAFL
BNL CL.2小鼠胚胎肝细胞 BNL CL.2 mouse embryo liver cells DMEM培养基+10%FBS 大鼠脱氢表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA试剂盒 MCP-4/CCL13(Mouse monocyte chemotactic protein 4) 小鼠单核细胞趋化蛋白4 96T
MAP3K9: 原活化蛋白激酶3K9抗体 HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Indonesia/5/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照)
NCI-H1781细胞THP-1 人单核细胞白血病细胞 大鼠促甲状腺素释放激素(H)ELISA试剂盒 ODF(Human osteoclast differentiation factor) 人破骨细胞分化因子 96T
RNF6: 环指蛋白6抗体 Ec109细胞,食管癌细胞 人卵巢癌细胞,COC1细胞 人脉络丛内皮细胞cDNAHCPEC cDNA
CXCL12 Others Cynomolgus 食蟹猴 CXCL12 / SDF-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠促甲状腺素释放激素(H)ELISA 试剂盒 OH-PYD(Human Hydroxy-Pyridinium crosslinks) 人羟基胶原交联 96T
Ribonuclease 6: 核糖核酸酶6抗体 中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS5A
CL-0418QGY-7703(人肝癌细胞)5×106cells/瓶×2 大鼠促甲状腺素(TSH)ELISA试剂盒 DPD(Human Deoxypyridinoline crosslinks) 人脱氧胶原交联 96T
GGT1 Others Rat 大鼠 GGT1 人细胞裂解液 (阳性对照) 人表皮生长因子(EGF)ELISA 试剂盒 ASK1/MAPKKK5 细胞凋亡信号调节激酶1/原活化蛋白激酶激酶激酶5抗原 0.5mg
Phospho(Tyr986 + Tyr987): 0酸化肌醇聚0酸盐0酸酶样蛋白1抗体 CM-R015大鼠胰岛细胞完全培养基100mL
M1细胞,小鼠白血病细胞 脆弱拟杆菌 新生牛眼Tenon's囊成纤维细胞;NBTF 人表皮角蛋白(EK)ELISA 试剂盒 Maspin (mammary serine protease inhibitor) 抑癌基因抗原 0.5mg
Inhibin Beta C: 抑制素βC抗体 ICAM3 Others Human 人 CD50 / ICAM3 人细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠胚胎成纤维细胞(来自NIH3T3);PA12 人表面膜免疫球蛋白M(mIgM)ELISA 试剂盒 Matriptase 蛋白裂解酶(一种新的癌基因)抗原 0.5mg
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