Bandpass Filter, 576/21 WB

【专题讨论】新手做WB的几张片子，请各位高人指点。

样品浓度（x值（ug/ul））。 酶标仪设定参数： MODE:END POINT; WELL:96; FILTER(波长): 596nm; 振荡速度：MEDIUM; 振荡时间：2min 2 SDS-PAGE 2.1主要试剂配制 30% 电泳凝胶：丙烯酰胺29.2 g，N, N-亚甲基双丙烯酰胺0.8 g，加三蒸水溶解，定容至100 ml，过滤后4℃备用。 20% SDS： 20 gSDS，加三蒸水溶解，定容至100 ml

WB转膜的条件设置

：Nitrocellulose Membrane 0.2 um Pore Size (Invitrogen) 转膜方式（恒压、恒流）：湿转，恒压 22 v 转膜时间：90 min 转膜设备：X-cell Sure Lock Mini-cell (Invitrogen) 建议改进方向：转膜过程冰水浴，保持低温，Transfer Buffer 重复使用。 蛋白来源：肾瘤细胞 蛋白分子量：39 kDa WB 用膜类型

Fluorochrome Absorption and Emission Spectra

daltons and an absorption maximum at 495 nm (Fig. 2). Its excitation by 488-nm light leads to a fluorescence emission maximum around 520 nm (Fig. 2). Using a 530 ?15 nm bandpass (BP) filter will give optimum detection for this fluorochrome