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上海博耀商贸有限公司
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文献和实验A. Plating: To sterilize glass coverslips, dip in ethanol and flame. We use 22x22x1 mm3 coverslips and put them in 6-well plates. Seed 100,000 cells per well overnight and fix the next day. B. Fixation: Remove the media
[实验原理] 碱裂解法提取质粒利用的是共价闭合环状质粒DNA与线状的染色体DNA片段在拓扑学上的差异来分离它们。在pH值介于12.0-12.5这个狭窄的范围内,线状的DNA双螺旋结构解开变性,在这样的条件下,共价闭环质粒DNA的氢键虽然断裂,但两条互补链彼此依然相互盘绕而紧密地结合在一起。当加入pH4.8的醋酸钾高盐缓冲液使pH降低后,共价闭合环状的质粒DNA的两条互补链迅速而准确地复性,而线状的染色体DNA的两条互补
O、chamber slide (Nunc 177380)或chamber slide替代物:35 or 60mm sterile plate内放置无菌22x22mm盖玻片:浸于酒精内,使用前过火灭菌:,一般吸附型细胞均能吸附在盖玻片上。染色后取出盖玻片,细胞面朝下放在玻片上观察。2.Indicator cells:Vero(African green monkey kidney,ATCC CCL-81 or CCRC 60013) or 3T6(mouse fibroblast, ATCC CCL-96
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