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- 技术资料
- 细胞类型:
人细胞系
- 供应商:
上海邦景
- 库存:
28
- 生长状态:
贴壁生长
- 是否是肿瘤细胞:
是
- 物种来源:
人
- 规格:
1×10^6cells
选择培养基没有一定的标准:
(1)建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞的培养基。可以查阅参考文献,或在购买细胞株时咨询。
(2) 其它实验室惯用的培养基不妨一试,许多培养基可以适合多种细胞。
(3) 根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选 RPMI1640
(4)用多种培养基培养目的细胞,观察其生长状态,可以用生长曲线、集落形成率等指标判断,根据实验结果选择最佳培养基,这是最客观的方法,但比较繁琐。
细胞系具有易培养、品类多、价格便宜、无限传代等优点,也非常容易在培养、冻存中发生错误鉴定及交叉污染的问题。
细胞系的实验步骤:
一、实验前准备工作
1、提前24h取12mL DMEM(abs9483)和RPMI 1640(abs9484)完全培养基(含10%FBS(abs972),下同)于50mL离心管内,置于4℃冰箱中预冷;
2、将分装好的Matrigel基质胶(abs9490)提前24h从-20℃放入4℃,使其融化成液体状态;
3、将无菌的1mL移液器枪头放入无菌50mL离心管内,置-20℃冰箱预冷。
二、琼脂糖包被96孔板
1、准确量取6mL RPMI 1640培养基(或DMEM培养基)于2个10mL的注射玻璃瓶内,加入90mg琼脂糖(abs44056213),盖塞后放入80℃的水浴锅内加热溶解30min;
2、加热结束后,将注射瓶放入灭菌锅内,115℃灭菌30min;
3、灭菌完成后,迅速取出注射瓶放入超净台内。将注射瓶内的琼脂糖溶液倒入无菌的加样槽中,用多通道移液器以每孔60μL的量加入96孔板内。注意:由于琼脂糖溶液在室温时会凝固,因此从灭菌锅内取出琼脂糖溶液后
一定要快速转移至超净台内并迅速加入至96孔板中。此外,为保证加样时琼脂糖不冷却,需要同时灭菌加样槽和100μL的移液器枪头。
4、加入完成后,96孔板要保持水平约30min使孔内的琼脂糖凝固。
如何正确地使用细胞系?
首先做好细胞系的保存,尽量多的保存早期分裂增殖的细胞系。因为随着传代次数增多,细胞系的稳定性下降,遗传物质,细胞形态,倍增时间等都可能发生改变。其次,熟悉所用细胞系的增殖和生长特点,熟悉它对营养物质的需求。比如,倍增时间,培养液需求特征,血清浓度要求等等。最后,定期做好细胞系鉴定工作,尤其是从外部借来使用的细胞系,要求其遗传谱图与细胞库中的一致。这点关系到你研究研究结果的可靠性和可重复性。
基础研究
(1)药物作用机理
(2)基因功能
(3)疾病发生机理
2、生物制药
(1)疫苗生产:如病毒性疫苗(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等)、肿瘤疫苗(多肽疫苗)等。
(2)基因工程药物生产:如在临床医学中具有治疗价值的一些细胞生长因子如干扰素、粒细胞生长因子、胸腺肽等。
(3)诊断用和药用单克隆抗体生产。
(4)细胞工程药物生产:生物细胞内的一些生物活性多肽,生物活性物质等。
细胞系的用途有哪些?
1、科学研究:药物研究开发与基础研究药物研究与开发
(1)新药筛选:如化学合成药物药效研究、中药有效成分筛选与鉴定等。
(2)疫苗研究与开发:如病毒性疫苗的研究与开发(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等)、肿瘤疫苗(多肽疫苗)等。
(3)基因工程药物研究与开发:如干扰素研究与开发,细胞生长因子研究与开发等。
(4)细胞工程药物研究与开发:生物活性多肽研究与开发,人参皂甙、紫杉醇等生物活性成分研究与开发。
(5)单克隆抗体制备:包括诊断用单克隆抗体,治疗用单克隆抗体。
下列是公司正在出售的产品:
GNAI3: 抑制型G蛋白α3抗体 人结肠平滑肌细胞裂解物HCSMCL
BT-549细胞,人癌细胞 白鲢尾鳍细胞,SCF细胞 颌下腺上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml) 人胰淀素(Amylin)ELISA 试剂盒 IgG/Cy5 Cy5标记的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml
GnRHR: 促性腺激素释放激素受体抗体 NETO1 Others Human 人 NETO1 / BTCL1 人细胞裂解液 (阳性对照)
CL-0204Sf-21(昆虫细胞)5×106cells/瓶×2 人胰淀粉酶(PAMY)ELISA 试剂盒 IgG/Cy5.5 Cy5.5标记的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml
GRB2: 生长因子受体结合蛋白2抗体 SKOV3/Taxol-25, 人卵巢癌紫杉醇耐药细胞株 Human
NSDHL: 类固醇脱氢酶样蛋白NSDHL抗体 人胚肺成纤维细胞;HFL-I
IL12B Protein Marmoset 重组绒猴 IL12B / IL-12B 蛋白 (Fc 标签) 大鼠生长分化因子3(GDF3)ELISA试剂盒 Col IV 大鼠Ⅳ型胶原 96T
Phospho-NFKB1(Ser373): 0酸化细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体 EPHB1 Others Mouse 小鼠 EphB1 / EPHT2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠膀胱平滑肌细胞完全培养基 100mL 大鼠生长分化因子2(GDF2)ELISA试剂盒 BDNF(Human Brain derived neurotrophic facor) 人脑源性神经营养因子 96T
phospho-NF1(Ser2817): 0酸化1型神经纤维瘤抗体 F81细胞,猫肾细胞 人结肠癌细胞,LS174T细胞 CM-H085人脐动脉平滑肌细胞完全培养基100mL
MCAS细胞CL-0182P815(小鼠肥大细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×2 大鼠白介素7(IL7)ELISA试剂盒 pERK(Human phospho-extracellular signal-regulated kinase) 人0酸化细胞外信号调节激酶 96T
RIPK-1: 丝酸苏酸激酶1受体相互作用蛋白抗体 EFNA3 Others Human 人 EphrinA3 / EFNA3 人细胞裂解液 (阳性对照)
人脐带间充质干细胞裂解物HUMSCL 大鼠白介素6受体(IL-6R)ELISA试剂盒 AChE(Human Acetylcholinesterase) 人乙酰胆碱酯酶 96T
RAIDD: CASP2凋亡相关蛋白抗体 恒河猴肾细胞;MMK2
人整合SV40基因的上皮细胞;HBL-100 [HBL100] 人肾动脉平滑肌细胞完全培养基 100mL 大鼠白介素6受体(IL6R)ELISA试剂盒 GOD(Human glucose oxidase) 人葡萄糖氧化酶 96T
IRX5: Iroquois同源蛋白5抗体 CDC37 Others Mouse 小鼠 CDC37 / CDC37A 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
人膀胱平滑肌细胞完全培养基 100mL 人S100A14钙结合蛋白(S100A14)ELISA 试剂盒 SRF(Serum response factor) 血清应答因子抗原 0.5mg
Integrin alpha E: 整合素αE抗体 草鱼肝脏细胞;L8824 人视网膜母细胞瘤,WERI-Rb-1细胞 KB(口腔表皮样癌细胞)
IL1R2 Others Mouse 小鼠 IL1R2 / CD121b 人细胞裂解液 (阳性对照) 人Qa淋巴细胞抗原2(Qa-2)ELISA 试剂盒 SREBP-1(Sterol Regulatory Element Binding Protein-1) 固醇调节元件结合蛋白1抗原
ICAM-2: 细胞间粘附分子-2抗体 牦牛皮肤细胞;BMU-S1
(1)建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞的培养基。可以查阅参考文献,或在购买细胞株时咨询。
(2) 其它实验室惯用的培养基不妨一试,许多培养基可以适合多种细胞。
(3) 根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选 RPMI1640
(4)用多种培养基培养目的细胞,观察其生长状态,可以用生长曲线、集落形成率等指标判断,根据实验结果选择最佳培养基,这是最客观的方法,但比较繁琐。
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| MCAS细胞 | 1×10^6cells | BJ-X6340 |
细胞系的实验步骤:
一、实验前准备工作
1、提前24h取12mL DMEM(abs9483)和RPMI 1640(abs9484)完全培养基(含10%FBS(abs972),下同)于50mL离心管内,置于4℃冰箱中预冷;
2、将分装好的Matrigel基质胶(abs9490)提前24h从-20℃放入4℃,使其融化成液体状态;
3、将无菌的1mL移液器枪头放入无菌50mL离心管内,置-20℃冰箱预冷。
二、琼脂糖包被96孔板
1、准确量取6mL RPMI 1640培养基(或DMEM培养基)于2个10mL的注射玻璃瓶内,加入90mg琼脂糖(abs44056213),盖塞后放入80℃的水浴锅内加热溶解30min;
2、加热结束后,将注射瓶放入灭菌锅内,115℃灭菌30min;
3、灭菌完成后,迅速取出注射瓶放入超净台内。将注射瓶内的琼脂糖溶液倒入无菌的加样槽中,用多通道移液器以每孔60μL的量加入96孔板内。注意:由于琼脂糖溶液在室温时会凝固,因此从灭菌锅内取出琼脂糖溶液后
一定要快速转移至超净台内并迅速加入至96孔板中。此外,为保证加样时琼脂糖不冷却,需要同时灭菌加样槽和100μL的移液器枪头。
4、加入完成后,96孔板要保持水平约30min使孔内的琼脂糖凝固。
如何正确地使用细胞系?
首先做好细胞系的保存,尽量多的保存早期分裂增殖的细胞系。因为随着传代次数增多,细胞系的稳定性下降,遗传物质,细胞形态,倍增时间等都可能发生改变。其次,熟悉所用细胞系的增殖和生长特点,熟悉它对营养物质的需求。比如,倍增时间,培养液需求特征,血清浓度要求等等。最后,定期做好细胞系鉴定工作,尤其是从外部借来使用的细胞系,要求其遗传谱图与细胞库中的一致。这点关系到你研究研究结果的可靠性和可重复性。
基础研究
(1)药物作用机理
(2)基因功能
(3)疾病发生机理
2、生物制药
(1)疫苗生产:如病毒性疫苗(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等)、肿瘤疫苗(多肽疫苗)等。
(2)基因工程药物生产:如在临床医学中具有治疗价值的一些细胞生长因子如干扰素、粒细胞生长因子、胸腺肽等。
(3)诊断用和药用单克隆抗体生产。
(4)细胞工程药物生产:生物细胞内的一些生物活性多肽,生物活性物质等。
细胞系的用途有哪些?
1、科学研究:药物研究开发与基础研究药物研究与开发
(1)新药筛选:如化学合成药物药效研究、中药有效成分筛选与鉴定等。
(2)疫苗研究与开发:如病毒性疫苗的研究与开发(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等)、肿瘤疫苗(多肽疫苗)等。
(3)基因工程药物研究与开发:如干扰素研究与开发,细胞生长因子研究与开发等。
(4)细胞工程药物研究与开发:生物活性多肽研究与开发,人参皂甙、紫杉醇等生物活性成分研究与开发。
(5)单克隆抗体制备:包括诊断用单克隆抗体,治疗用单克隆抗体。
下列是公司正在出售的产品:
GNAI3: 抑制型G蛋白α3抗体 人结肠平滑肌细胞裂解物HCSMCL
BT-549细胞,人癌细胞 白鲢尾鳍细胞,SCF细胞 颌下腺上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml) 人胰淀素(Amylin)ELISA 试剂盒 IgG/Cy5 Cy5标记的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml
GnRHR: 促性腺激素释放激素受体抗体 NETO1 Others Human 人 NETO1 / BTCL1 人细胞裂解液 (阳性对照)
CL-0204Sf-21(昆虫细胞)5×106cells/瓶×2 人胰淀粉酶(PAMY)ELISA 试剂盒 IgG/Cy5.5 Cy5.5标记的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml
GRB2: 生长因子受体结合蛋白2抗体 SKOV3/Taxol-25, 人卵巢癌紫杉醇耐药细胞株 Human
NSDHL: 类固醇脱氢酶样蛋白NSDHL抗体 人胚肺成纤维细胞;HFL-I
IL12B Protein Marmoset 重组绒猴 IL12B / IL-12B 蛋白 (Fc 标签) 大鼠生长分化因子3(GDF3)ELISA试剂盒 Col IV 大鼠Ⅳ型胶原 96T
Phospho-NFKB1(Ser373): 0酸化细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体 EPHB1 Others Mouse 小鼠 EphB1 / EPHT2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠膀胱平滑肌细胞完全培养基 100mL 大鼠生长分化因子2(GDF2)ELISA试剂盒 BDNF(Human Brain derived neurotrophic facor) 人脑源性神经营养因子 96T
phospho-NF1(Ser2817): 0酸化1型神经纤维瘤抗体 F81细胞,猫肾细胞 人结肠癌细胞,LS174T细胞 CM-H085人脐动脉平滑肌细胞完全培养基100mL
MCAS细胞CL-0182P815(小鼠肥大细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×2 大鼠白介素7(IL7)ELISA试剂盒 pERK(Human phospho-extracellular signal-regulated kinase) 人0酸化细胞外信号调节激酶 96T
RIPK-1: 丝酸苏酸激酶1受体相互作用蛋白抗体 EFNA3 Others Human 人 EphrinA3 / EFNA3 人细胞裂解液 (阳性对照)
人脐带间充质干细胞裂解物HUMSCL 大鼠白介素6受体(IL-6R)ELISA试剂盒 AChE(Human Acetylcholinesterase) 人乙酰胆碱酯酶 96T
RAIDD: CASP2凋亡相关蛋白抗体 恒河猴肾细胞;MMK2
人整合SV40基因的上皮细胞;HBL-100 [HBL100] 人肾动脉平滑肌细胞完全培养基 100mL 大鼠白介素6受体(IL6R)ELISA试剂盒 GOD(Human glucose oxidase) 人葡萄糖氧化酶 96T
IRX5: Iroquois同源蛋白5抗体 CDC37 Others Mouse 小鼠 CDC37 / CDC37A 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
人膀胱平滑肌细胞完全培养基 100mL 人S100A14钙结合蛋白(S100A14)ELISA 试剂盒 SRF(Serum response factor) 血清应答因子抗原 0.5mg
Integrin alpha E: 整合素αE抗体 草鱼肝脏细胞;L8824 人视网膜母细胞瘤,WERI-Rb-1细胞 KB(口腔表皮样癌细胞)
IL1R2 Others Mouse 小鼠 IL1R2 / CD121b 人细胞裂解液 (阳性对照) 人Qa淋巴细胞抗原2(Qa-2)ELISA 试剂盒 SREBP-1(Sterol Regulatory Element Binding Protein-1) 固醇调节元件结合蛋白1抗原
ICAM-2: 细胞间粘附分子-2抗体 牦牛皮肤细胞;BMU-S1
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