- ￥780 - 5460
- 西格
- XG-P3107
- 国产
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
31
- 保质期：
3 年
- 供应商：
上海西格
- 保存条件：
-20°C
- 规格：
200U/2000U
| 规格： | 200U | 产品价格： | ￥780.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 2000U | 产品价格： | ￥5460.0 |
| 货号 | 产品名称 | 规格 |
| XG-P3107 | 热稳定无机焦磷酸酶 | 200U |
| XG-P3107 | 热稳定无机焦磷酸酶 | 2000U |
热稳定无机焦磷酸酶保证模板DNA解链完全是保证整个PCR扩增成功的关键。加热90~95°C, 30~60s，再复杂的DNA 分子也可变性为单链。温度过高或高温持续时间过长，可对Taq酶活性和dNTP分子造成损害。
2、复性温度和时间:
PCR扩增特异性取决于复性过程中引物与模板的结合。复性温度越高，产物特异性越高。复性温度越低，产物特异性越低。需根据引物的Tm值具体设定。
3、延伸温度和时间:
一般位于Taq酶最适作用温度70~75°C之间。引物小于16个核苷酸时，过高的延伸温度不利于引物与模板的结合，可以缓慢升温到70~75°C。延伸反应时间，可根据待扩增片段的长度而定，小于1kb, 1min足够；大于1kb需加长延伸时间。Taq酶可根据1kb/min增加时间。这里需要注意，延伸时间过长可能出现非特异扩增。因此需要设置恰到好处的延伸时间。
4、循环数:
其他参数选定后，PCR循环次数主要取决于模板DNA的浓度。理论上说20〜25次循环后，PCR产物的积累即可达到最大值，实际操作中由于每步反应的产率不可能达到100%，因此不管模板浓度是多少，20~30次是比较合理的循环次数。循环次数越多，非特异扩增增加。
描述：
热稳定无机焦磷酸酶纯化自重组 E. coli 菌株，携带从极度耐热的 Thermococus litoralis 中克隆的无机焦磷酸酶基因。该焦磷酸酶催化无机焦磷酸盐水解生成正磷盐。–4 + H20 →2HP04–2。该酶在 100°C 加热 4h 仍然具有
100%活性，因此可用于 PCR 反应，解除生成的无机焦磷酸盐对 PCR 的抑制，增强 DNA 的复制。
储存：-20℃可保存 3 年。
活性定义：
1单位指标准反应条件下：0.5ml反应体系，50 mMTricine pH8.5，1 mM MgCl2 和 0.32 mM PPi，75°C 反应 钟，每分钟催化无机焦磷酸盐生成 1μmol 磷酸盐的酶量。
使用注意事项：
（1） 该酶在多种反应 Buffer 中均具有活性，通常该酶在tHDA 扩增、PCR、测序反应等实验中，可直接接入即可。
（2） 该酶的用量在不同的实验中需要优化，通常在 5~50U/ml 浓度调整。
（3） 该酶不可以热失活。
降落PCR与温度梯度PCR都是对反应体系中的退火温度进行优化，但两者在原理上有所不同。
温度梯度PCR是为了找到最适的退火温度，设置不同的退火温度进行多管PCR，将其分别放置在PCR仪中的不同温度模块进行反应，最终找到最适的退火温度，并进一步以此退火温度进行普通PCR扩增。
降落PCR是为了提高反应的特异性，通过设计一系列不断降低的退火温度，在同一PCR管内进行PCR扩增，最终获得大量的特异性扩增产物。
与温度梯度PCR相比，降落PCR更有优势。温度梯度PCR需要多次反应或多管反应找到最适的退火温度，之后还需以找到的最适退火温度再次进行PCR，才能得到较好的扩增效果，操作比较繁琐。降落PCR只需一次反应就可以获得很好的扩增效果，避免了对每对引物进行最适退火温度的优化和测定工作。
降落PCR适用于不确定引物的最适Tm值，或引物扩增效果不佳时，不了解目的模板同源性程度，使用降落PCR可以快速、特异的得到目的扩增片段。根据不同实验的需要，降落PCR还可与其它PCR方法同时使用，如实时定量降落PCR、竞争降落PCR等。
PCR的特点：
特异性强：使用两对引物进行扩增提高了特异性，第一轮PCR中由外引物错配产生非特异性产物，同时在第二轮PCR中内引物与错误片段配对扩增的概率极低，降低了扩增多个靶位点的可能性。
灵敏度高：进行两轮PCR扩增，可以执行更多的循环，从低拷贝样本中扩增得到足量的产物，克服了单次扩增平台期限制，提高PCR的灵敏度。
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文献和实验H4 P2 O7 ，缩写为 PPi，亦称二磷酸（ diphosphoric acid）。可由水解变成正磷酸，在无机焦磷酸酶的作用下，也能产生酶促水解。是四碱基酸，与金属形成络合物的性质强，对各种金属酶起抑制作用。有些辅酶是焦磷酸酯，它和酶起作用时，需要 Hg2 等二价金属离子。在生物界，微生物、霉菌、藻类等都有发现。已知在动物的酶促反应中，是通过 ATP等的酶促水解与其它基质的相互作用生成的。例如在很多生物合成反应中，都会发生 ATP的焦磷酸分解， ATP→ AMP PPi
气液填充柱色谱仪的载体是一种化学惰性物质，为了使固定液和流动相之间的接触面积尽可能大，大部分为多孔性固体颗粒。 一、载体的性能要求： 1、有较大的表面积。 2、孔径分布均匀。 3、化学惰性好，不与固定液和样品组分发生化学反应。 4、热稳定性好。 5、有一定的机械强度。 6、表面没有吸附性或吸附性很弱。 在实际工作中，要找出完全满足上述要求的载体比较困难，只能根据具体分析对象选出性能比较优良的载体。 二、载体的种类： 气液填充
可以用作气相色谱仪固定液的物质很多，已被采用的有近千种。根据化学结构的不同，这些固定液可分为烃类、聚硅氧烷类、聚二醇及聚烷基氧化物、酯类、其它含氧化合物、含氮化合物、含硫及硫杂环化合物、含卤素化合物及其聚合物、无机盐和其它固定液。这些固定液中，有许多固定液的色谱分离性能相同或者近似，我们可以限定少数几种固定液代替种类繁多的固定液，在有限的几种固定液范围内进行选择，使分析工作简化。 一、常用固定液的确定标准： 1、色谱性能具有代表性。 2、便于重复制备与精制。 3、热稳定
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