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- 文献和实验
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- 供应商:
麦格生物
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现货
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/
- 规格:
10盒/包,5包/箱
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文献和实验浴1分钟 5, 趁热加入Tag酶0.5ul(冰上操作) 6, 再加入50ul液体石蜡封闭 7, 10000rmp离心1分钟 8, PCR条件 94℃ 1min 58℃ 50sec 72℃ 1min30sec 进行40个循环,然后72℃ 10min 完后4℃保温。 9,10000rmp离心5min 10,将下层水相转入新的0.65mlEP管中,-20℃保存。 电泳鉴定 一,准备工作 1,实验器具与材料: (1)移液枪:10ul (2)吸头:20ul (3)吸头
物用2ml冰预冷的0.1M CaCl2重悬每份沉定,此时,可以迅速将细胞分装成小份,液氮中冰冻,-70℃贮存备用。9、 用冷却的无菌吸头从每种感受态细胞悬液中各取200μl转移到无菌的微量离心管中,每管加DNA或连接反应混合物(体积≤10μl,DNA≤50ng),轻轻旋转以混匀内容物,在冰中放置30min。10、 将离心管放到预加温到40℃的循环水浴中的试管架上,放置90s~2min,不要摇动试管。11、 快速将管转移到冰浴中,使细胞冷却1~2min。12、 每离心管加800μlSOC培养基,用水
时间长,可加入penicillin(50u/ml)至10x stock solution或加入thallium acetate (1:2000)至培养基中以防止其它细菌污染。 · 10x stock solution (1 liter) :称取50 g dextrose,10 g L-arginine HCl,溶于1 liter蒸馏水中。以0.22μm无菌过滤膜过滤灭菌。分装100 ml至瓶中,保存于 -70℃。 · 液体培养基 (1 liter) :称取21 g之Difco PPLO
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