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- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
麦格生物
- 现货状态:
现货
- 保修期:
/
- 规格:
10盒/包,5包/箱
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文献和实验: (1)移液枪:200ul、10ul (2)吸头:200ul、20ul (3)EP管1.5ml、100ul (4)水浴箱 2,实验器具的处理与准备 塑料制品:(包括吸头、EP管等) 将塑料制品逐个浸泡于1‰DEPC水中(必要时小枪头需要用吸管打入DEPC水)37℃过夜,然后送至高压3次,后在80℃烘烤箱中烘干(或置于37℃中8小时左右烘干),试验前将枪头放入吸头台。 3,试剂配制和准备: (1)DEPC水:泡实验器具的DEPC水的配制:1000ml双蒸水中加1mlDEPC,放在1000ml
water:无Rnase的水。方法是:将DEPC按0.01%(V/V)加在dH2O中500 ml(50 ul),在37 ℃过夜,并高压灭菌即得(150 ℃ 3小时) 5. 一次性塑料手套 6. 注意:DEPC有致癌之嫌 7. 抽提出的细胞总RNA干燥后加水50 ul,取10 ul加无Rnase水990 ul,稀释100倍成1 ml。于0.5 cm厚的石英比色杯中,以无Rnase水为对照,在721型紫外分光光度计下检测,结果应为:A260/280 ratio 8. 分离组织10 mg
从原代构建到多组学验证,肾小管类器官慢病毒工程化标准操作Protocol!
后的单细胞悬液。 注:扩增速率因组织/肿瘤类型而异。通常肾小管类器官每7天可按1:2-1:3比例传代,推荐接种密度为1000-2500个细胞/μLBME。待传代类器官示例见图A。 1.用1000μL带滤芯吸头,利用孔内培养基反复吹打散液滴与类器官;用吸头刮擦孔底,收集所有贴壁细胞,全部内容物转移至15mL离心管。 2.加入10mL预冷AdvDF+++培养基,4℃、250×g离心5分钟,弃上清。 3.向沉淀中加入添加Rho激酶抑制剂(10μM)的TrypLE消化液;每100μL含类器官的BME对应
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