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SA-β-Gal细胞衰老检测
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广州誉嘉生物科技有限公司
用途
组织切片染色或细胞染色,用于检测观察细胞衰老情况。
步骤
(1)需要染色的组织做冰冻切片,切片复温侯,用 PBS 轻柔洗涤 3 次,每次 5 分钟。
(2)用组化笔圈住组织,加入适当体积的染色固定液固定 30 分钟,体积以充分覆盖组织为宜。
(3)去除染色固定液,用 PBS 洗 3 次,每次 8 分钟。
(4)去除 PBS,每个组织加 30 μl SA-β-gal 染色液,最好正个切片浸泡在染色液中,可用保鲜膜封住防止蒸发,37 ℃ 孵育过夜。
(5)第二天,弃掉工作液,加封片剂封片,光学显微镜下观察拍照。
(1)对于 6 孔板中培养的细胞,吸除细胞培养液,用 PBS 或 HBSS 洗涤 1 次,加入 1 ml 染色固定液,室温固定 15 分钟。
(2)吸除固定液,用 PBS 或 HBSS 洗涤细胞 3 次,每次 3 分钟。
(3)吸除 PBS 或 HBSS,每孔加入 1 毫升 SA-β-gal 染色液。
(4)37 ℃ 孵育过夜,可以用保鲜膜封住防止染色液蒸发。
(5)普通光学显微镜下观察。如不能及时观察计数,可以去除染色工作液,加入 2 ml PBS,4 ℃ 可以保存数天;或者加上封片液封片后,4 ℃ 可以保存较长时间。
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