L Wnt-3A小鼠皮下结缔组织细胞

商品属性：

产品名称	规格	货号
L Wnt-3A小鼠皮下结缔组织细胞	1×10^6cells	BJ-X1070

一、细胞基本属性

细胞名称	L Wnt-3A小鼠皮下结缔组织细胞
细胞别称	L-Wnt-3A; L-Wnt3A; LWnt3A; LWnt-3A；小鼠皮下结缔组织细胞
种属来源	小鼠
年龄性别	雄；100日龄
组织来源	组织：皮下结缔组织；疏松结缔组织及脂肪 品系：C3H/An
生长特性	贴壁生长
细胞形态	成纤维细胞样
背景简介	L Wnt-3A细胞是由L-M(TK-)细胞用Wnt-3A表达载体转染并在含G418的培养基中筛选出的稳转株。Wnt-3A基因编码一个有变异的信号功效分泌性糖蛋白，Wnt基因控制胚胎发过程中的许多模式形成和生长事件。L Wnt-3A细胞分泌有生物活性的Wnt-3A蛋白，L Wnt-3A细胞是目前生产Wnt-3A条件培养基的最好来源。由于这种条件培养基还包含Wnt-3A蛋白外的其他因子，对于涉及Wnt-3A条件培养基的实验有必要用其来源细胞株作对照。
生物安全等级	1
细胞规格	1×10^6cells
支原体检测	无
基因表达情况
保藏机构	ATCC; CRL-2647
培养条件	气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
冻存条件	无血清冻存液，液氮储存
培养基	DMEM+0.4mg/ml G418+10% FBS+1% P/S
倍增时间

二、细胞培养操作
收货方式 ：T25瓶 ，冻存管
收货处理 ：观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁，将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h，以便稳定细胞状态    收到细胞后，需立即转入液氮冻存或直接复苏
传代密度 ：细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养    第二天换液并检查细胞密度
传代比例 ：首次传代建议1：2传代 ，1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿    一管细胞建议接种到10cm培养皿或者T25瓶

传代方法

a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。         b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3 min（视细胞贴壁情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。         c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。

将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6 cm皿中，加入约4 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

三、培养注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象 发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由 客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度 变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。
4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞，再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，，用新鲜的完全培养基重悬 细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞 的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。
8. 备注：运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议 1：2 传代 。
9. 注意：1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
公司正在出售的产品：
"1-Mar： 膜相关环指蛋白1抗体 小鼠肺腺癌低转移细胞(绿色荧光蛋白标记);LA1-GFP
NCTC 1469(小鼠正常肝细胞) 5×106cells/瓶×2 HCT 116(结肠癌细胞) 大鼠纤维蛋白原α链(Fga)ELISA试剂盒 KGF(Human Keratinocyte Growth Factor)  人角化细胞生长因子 96T
2-Mar： 膜相关环指蛋白2抗体 仓鼠卵巢细胞;Lec1
IL36A Protein Human 重组人 IL1F6 / IL36A 蛋白 (His 标签) 大鼠纤维蛋白原α(FGα)ELISA试剂盒 ACE(Mouse Angiotensin converting enzyme)  小鼠血管紧张素转化酶 96T
3-Mar： 膜相关环指蛋白3抗体 AARS Others Mouse 小鼠 AARS / alanyl-NA syhetase 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)"    "中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-p7 人丁型肝炎IgG(HDV IgG)ELISA 试剂盒 GLUT3(Glucose transporter 3) 葡萄糖转运蛋白3抗原 0.5mg
HDX： 高度发散同源异型盒蛋白抗体 EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMYM
MDCK(犬肾细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CRELD2 人细胞裂解液 (阳性对照) 人丁肝抗原(HDV-Ag)ELISA试剂盒 GM-CSF(Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factors) 粒细胞-巨噬细胞克隆刺激因子抗原 0.5mg
Adenovirus hexon protein： 腺病毒六邻体蛋白抗体 间充质干细胞成骨细胞分化培养基MODM-prf
XCL1 Protein Canine 重组狗 XCL1 蛋白 (His 标签) 人叠氮胸苷(AZT)ELISA 试剂盒 GPA33(glycoprotein A33 transmembrane) 糖蛋白A33(跨膜)抗原 0.5mg"    "Phospho-PTEN(Ser380)： 0酸化抑制基因PTEN抗体 大额牛与婆罗门牛杂交F1代皮肤成纤维样细胞;BOS-6
人羊膜细胞;HA 人淋巴血管内皮细胞完全培养基 100mL 大鼠多巴胺转运蛋白(DAT)ELISA 试剂盒 LATS(Human Long acting thyroid stimulator)  人长效甲状腺刺激素 96T
Phospho-PTEN(Ser380 + Thr382 + Thr383)： 0酸化抑制基因PTEN抗体 原代成纤维细胞特制基础培养基Many types of cells包装：500/250/100ml
SERPINF1 Protein Mouse 重组小鼠 SerpinF1 / PEDF 蛋白 (His 标签) 大鼠多巴胺受体D4(DRD4)ELISA试剂盒 IL-18  大鼠白介素18 96T
Paxillin： 桩蛋白Paxillin抗体 BTN3A3 Others Human 人 BTN3A3 人细胞裂解液 (阳性对照)"    "BC-021(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 兔子巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA 试剂盒 IgM/PE-Cy3 PE-Cy3标记的兔抗猴IgM 0.1ml
FXR1： 脆性X相关蛋白1抗体 大鼠腹部脊髓神经元(RVSCI)(1×106)
L Wnt-3A小鼠皮下结缔组织细胞EB病毒转化的人B淋巴细胞(傣族);KM9405 兔子胶原酶II(Collagenase II)ELISA 试剂盒 IgM/PE-CY5 PE-CY5标记的兔抗猴IgM 0.1ml
FBXO31： F-box蛋白家族FBXO31抗体 615小鼠滑膜肉瘤瘤株;ZM755 小鼠膀胱平滑肌细胞完全培养基 100mL
IL17RA Others Mouse 小鼠 IL17RA / IL17R / CD217 人细胞裂解液 (阳性对照) 兔子胶原酶I(Collagenase I)ELISA 试剂盒 IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的兔抗长爪沙鼠IgG 0.1ml"