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总脂酶测试盒

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    总脂酶测试盒
    (测脂蛋白脂酶 LPL 及肝脂酶 HL
    产品细节图片1
    二﹑操作步骤:
    1、样本的前处理:
    ①、称取组织的重量,按重量(g:体积(mL=19的比
    例,加入 9倍体积的生理盐水,冰水浴条件下机械匀
    浆,制成 10%组织匀浆,2500/分,离心 10 分钟,
    取上清液待测。
    ②、血清(浆)样本直接取样进行测定。
    2、操作表:
    吸取下层抽提液时最好采用玻璃注射器及硬膜外麻醉针心
    针套进行操作。
    产品细节图片2
    注:详细操作步骤:
    1、充分混匀抽提 2 分钟~5 分钟(用秒表计时)。在抽提前用
    塞子或薄膜将试管封口,在抽提过程中注意观察试管中液
    体上下有无混匀,在一边混匀时一边要观察混匀液上下颜
    色否均匀一致,如果发现颜色上深下浅则需要将管子提起
    来再放下混匀,使得在混匀过程中混匀液上下颜色一致。
    混匀 2 分钟后,观察混匀液是否分层,如果立即分层且管
    底呈透明则需继续混匀不立即分层或管底为乳白色状为止
    (空白和标准管除外)。
    2吸取试剂六抽提液时必须用玻璃移液管进行操作。
    3抽提完后以 3500 /分,离心 10 分钟,若发现下层液体呈
    半凝固状态凝固层较厚或下层液体不足 1mL 时,则可用
    小玻棒或硬膜外麻醉针心轻轻搅拌下层液体后再次离心,
    直至分层清楚。
    4用注射器接上硬膜外麻醉针套吸取上层液体及凝固层并弃
    之。
    5另取一个注射器及硬膜外麻醉针心针套(不可以用注 2
    3 中的注射器及针心针套),在每吸取一个测定管前先
    用无水乙醇涮洗 23 次,再用试剂六抽提液涮洗 23
    次。然后将硬膜外麻醉针心插入针套中,小心插入下层抽
    提液中,拔出针心,接上注射器吸取下层抽提液 1.3
    1.5mL 至另一试管中。(这样可避免上层液体及凝固层混
    入下层液体中,否则会影响结果。)若偶然发现抽提液有
    雾状混浊,可放入 37℃水浴 12 分钟,雾状混浊即可消
    失。
    6再从上述试管中用移液器准确吸取 1mL 下层抽提液加入另
    一试管中,加显色剂进行显色。
    7先用无水乙醇将比色皿洗干净后,再将试剂六倒入比色皿
    中进行调零。
    8操作工程中只能用玻璃管,不能用塑料材质的试管代替。
    以上八点为实验成败的关键。
    四﹑测试原理:
    脂蛋白脂酶(LPL)和肝脂酶(HL)可分解甘油三酯(TG)
    并水解为甘油及游离脂肪酸(FFA),用铜试剂测定生成的
    游离脂肪酸(FFA)的量即可分别计算脂蛋白脂酶(LPL)和肝
    脂酶(HL)的活性。
    肝 脂 酶 为 糖 蛋 白 , 其 活 性 不 需 要 载 脂 蛋 白
    (apolipoprotin)CⅡ激活及一些离子的激活,不受高浓度盐
    及鱼精蛋白的抑制,利用此特点即可分别计算脂蛋白脂
    (LPL)和肝脂酶(HL)的活性。
    五﹑测定意义:
    脂蛋白脂酶(Lipoprotein Lipase LPL)存在肝外组织
    毛细血管内皮细胞表面,它主要催化血浆中乳糜微粒
    CM)和极低密度脂蛋白(VLDL)中的甘油三酯
    TG)水解,在乳糜微粒(CM)及极低密度脂蛋白
    VLDL)的降解中发挥重要作用。
    肝脂酶(Hepatic Lipase HL)则仅存在肝内皮细胞
    表面,它主要在中密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白
    HDL)代谢中起重要作用。

    总脂酶测试盒

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