- ￥60 - 100
- 联祖
- LZ-S01369
- 国产
- 2025年07月13日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海联祖
- 库存：
24
- 检测方法：
微量法、可见分光光度法
- 规格：
100管/96样/50管/48样
| 规格： | 100管/96样 | 产品价格： | ￥100.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 50管/48样 | 产品价格： | ￥60.0 |
| 产品名称 | 双缩脲法蛋白含量测试盒 |
| 规格 | 100管/96样 50管/48样 |
| 测试方法 | 微量法、可见分光光度法 |
| 货号 | LZ-S01369 |
商品介绍：
测定意义
强碱性溶液中，双缩脲与CuSO4形成紫色络合物；紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。该方法测定范围为1~10mg蛋白质，适用于蛋白质浓度高的样品，尤其是动物材料。
试剂组成和配置
1、双缩脲试剂×1瓶，4℃保存；
2、10mg/ml标准蛋白×1支，-20℃保存；
3、标准蛋白配制：取10mg/ml标准蛋白100μl加双蒸水100μl，即得5mg/ml标准蛋白溶液。
注意事项：
1.阳性对照H2O2一般使用浓度为100 μM （推荐浓度50-200 μM，具体依细胞类型而定） 。通常刺激后30 min-4 h可以观察到显著的活性氧水平升高。对于不同的细胞，活性氧阳性对照的效果可能有较大的差别。如果在刺激后30 min内观察不到活性氧的升高，可延长诱导时间或适当提高活性氧阳性对照的浓度。如果荧光信号过强，可缩短诱导时间或适当降低活性氧阳性对照的浓度。
2.实验过程中，如果阴性对照细胞荧光也比较强，可以按照1:2000-1:5000 稀释荧光探针DCFH-DA，使DCFH-DA的终浓度为 2-5 μM。探针装载的时间可在15-60 min 内适当进行调整，尽量缩短读片时的曝光时间，并且试验组、对照组曝光时间需保持一致。
活性氧阳性对照 (H2O2) 仅仅用于作为阳性对照的样品，并非所有试验组样品中都需加入活性氧阳性对照。
3.探针装载后，一定要洗净未进入细胞内的探针，否则会导致背景较高。
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1.双缩脲法 蛋白质中的肽键在碱性溶液中能与铜离子作用产生紫红色络合物。此反应和两个尿素分子缩合后生成的双缩脲在碱性溶液中与铜离子作用形成的紫红色的反应相似，故称之为双缩脲反应。这种颜色反应强度在一定浓度范围内与蛋白质含量成正比，医学教育网搜|集整理经与同样处理的蛋白质标准液比较，即可求得蛋白质含量。 2.微量凯氏定氮波氏显色法 血清中蛋白质及非蛋白含氮化合物经硫酸作用后变成铵，后者用酚－次氯酸盐试剂显色后测定总氮。总氮减去非蛋白氮，最后换算成蛋白含量。
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