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蔗糖磷酸合成酶(SPS)测试盒

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    蔗糖磷酸合成酶(SPS)测试盒
    (微板法 48T)
    一、测定原理:
    SPS 催化果糖-6-磷酸形成蔗糖磷酸,再用蔗糖磷酸
    与间苯二酚反应生成的物质在 480nm 处测定吸光值来测
    定其含量,从而可以计算 SPS 的活性。
    二、检测意义:
    蔗糖磷酸合成酶(Sucrose Phosphate SynthaseSPS
    主要在绿色光合器官中进行蔗糖合成,在贮藏器官中蔗
    糖磷酸合成酶活性则很低。但有实验证明,在蔗糖源池
    的蔗糖流通中,包含着一个无效的循环,即蔗糖同时合
    成与分解,此时蔗糖磷酸合成酶活性很强。因此蔗糖磷
    酸合成酶在库组织中的作用不可低估,在光合与非光合
    组织中蔗糖磷酸合成酶活性被代谢产物与可逆的蛋白质
    磷酸化所调节。
    样本前处理:
    ①、组织样本:将植物组织用生理盐水漂洗干净,滤纸
    吸干,准确称重,按重量(g):体积(ml)=1:9 的
    比例(水分含量多的样本可用 1:2 的比例)加入提
    取液,冰水浴条件下匀浆制成 10%的匀浆液,4000
    转/分,离心 10 分钟,取上清待测。(如需测蛋白浓
    度,蛋白定量试剂盒本所有售)
    ②、液体样本:直接测定。如有浑浊,4000 转/分离心 2
    分钟后取上清液待测。
    七、注意事项:
    1、测试前尽量选 1-2 个样本做预试,以确定样本适宜浓
    度及实验流程;
    2、制备样本上清时可按实际情况制备所需样本浓度,提
    取液加入比例可按 1:5~10 进行;
    3、如果自己制备标准曲线,则所测样本数降低;如果不
    做标准曲线,可按公式直接计算;
    4、样本蛋白浓度可用本公司的 A045 系列(BCA 法或考
    马斯亮蓝法)进行测定;
    5、若△A 偏小(或在零附近徘徊),可增加样本加样体
    积(如 30μL,则加入试剂三体积相应减少),或提高
    样本浓度(如 0.2g 加 1mL 提取液提取),或延长 37℃
    反应时间(如 40min,计算时相应的变量代入计算公
    式计算);
    6、如样本△A 值大于 0.6,则需将样本上清稀释以后进
    行测定;
    7、95℃水浴时,可将离心管口缝隙用封口膜封紧后进行;
    8、每个样本都需设定一个对照管。

    蔗糖磷酸合成酶(SPS)测试盒

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