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蔗糖合成酶(SS)测试盒

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    蔗糖合成酶(SS)测试盒
    (微板法 48T)
    一、 测定原理:
    SS催化游离果糖与葡萄糖供体 UDPG 反应生成蔗糖,
    再用蔗糖与间苯二酚反应生成的物质在 480nm 处测定吸
    光值来测定蔗糖含量,从而可以计算 SS 的活性。
    二、 检测意义:
    蔗糖合成酶(Sucrose Synthase,SS)既对蔗糖合
    成起主要作用,又在根部蔗糖贮藏过程中起重要的调节
    作用,根中蔗糖贮藏开始的特点是蔗糖合成酶的活力出
    现并随之增高。通过蔗糖合成酶的作用,当蔗糖合成酶
    分解活性大于其合成活性时,蔗糖即被分解,形成大量
    同化器官建成需要的基础物质;而当蔗糖合成酶合成活
    性大于其分解活性时,则有利于蔗糖的形成。所以在植
    物的生育过程中,蔗糖合成酶活性的调节在蔗糖代谢分
    配上显得尤为重要。
    三、样本前处理:
    ①、组织样本:将植物组织用生理盐水漂洗干净,滤纸
    吸干,准确称重,按重量(g):体积(ml)=1:9 的
    比例(水分含量多的样本可用 1:2 的比例)加入提
    取液,冰水浴条件下匀浆制成 10%的匀浆液,4000
    转/分,离心 10 分钟,取上清待测。(如需测蛋白浓
    度,蛋白定量试剂盒本所有售)
    ②、液体样本:直接测定。如有浑浊,4000 转/分离心
    2 分钟后取上清液待测。
    七、注意事项:
    1、测试前尽量选 1-2 个样本做预试,以确定样本适宜浓
    度及实验流程;
    2、制备样本上清时可按实际情况制备所需样本浓度,提
    取液加入比例可按 1:5~10 进行;
    3、如果自己制备标准曲线,则所测样本数降低;如果不
    做标准曲线,可按公式直接计算;
    4、样本蛋白浓度,可用本公司的 A045 系列(BCA 法或
    考马斯亮蓝法)进行测定;
    5、若△A 偏小(或在零附近徘徊),可增加样本加样体
    积(如 30μL,则加入试剂三体积相应减少),或提高
    样本浓度(如 0.2g 加 1mL 提取液提取),或延长 37℃
    反应时间(如 40min,计算时相应的变量代入计算公
    式计算);
    6、如样本△A 值大于 0.6,则需将样本上清稀释以后进
    行测定;
    7、95℃水浴时,可将离心管口缝隙用封口膜封紧后进行;
    8、每个样本都需设定一个对照管。
    蔗糖合成酶(SS)测试盒

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