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-20℃保存
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Recombinant Diphosphoinositol Pentakisphosphate Kinase 1 (PPIP5K1)
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
50ug/50ug
| 规格: | 50ug | 产品价格: | ¥2180.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50ug | 产品价格: | ¥3980.0 |
产品英文名称:Recombinant Diphosphoinositol Pentakisphosphate Kinase 1 (PPIP5K1)
别名:HISPPD2A; IPS1; VIP1; Histidine Acid Phosphatase Domain Containing 2A; InsP6/PP-IP5 kinase 1; Inositol hexakisphosphate and diphosphoinositol-pentakisphosphate kinase 1
种属:Mus musculus (Mouse)
蛋白序列:Ala514~Thr857
标签:N-terminal His Tag
Uniprot:A2ARP1
表达系统:Prokaryotic expression
来源:E.coli
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文献和实验的质粒同时转染,两个质粒都可能整合形成稳定转化子。对于两种不同质粒的共转染,带有目的基因的质粒和带有筛选标记的质粒间的比例为3:1或更高以保证抗性克隆带有转染的目的基因。 10蛋白表达和培养基的选择 哺乳动物细胞系合成可溶的、翻译后修饰的蛋白,比细菌,真菌或昆虫细胞中表达的蛋白更有可能有生物活性。稳定转染的细胞可以合成大量的重组蛋白,而瞬时转染细胞可以快速表达,迅速地合成小量蛋白。普健生物使用细胞系包括CHO,HEK293,CHO-S,CHO-K1等常用细胞系。普健生物提供克隆的HEK
一、原核蛋白表达及纯化 1、怎样提高E.coli中6′His标签蛋白的表达水平? 6 × His标签蛋白的表达水平低原因可能为:目标蛋白有毒或不稳定,或者是细菌生长过程中不能维持表达结构。有时候,插入片段的5’端序列编码了干扰转录或翻译的元件(比如有反向重复序列而形成茎环结构,掩盖了Shine-Dalgarno序列),在这种情况下,有必要检查和修改表达序列。改变培养基和宿主菌也可能会有所帮助。 外源性蛋白的表达会使宿主菌生长迟缓。高速的转录、翻译重组蛋白所需要的代谢消耗,导致宿主菌生长
Ladder 提供了蛋白分子量标准和Western Blot的阳性参照。 二、真核荧光蛋白的表达 1、 检测不到瞬时转染细胞中的GFP表达,该怎么办? 1) 确定检测的方法正确,例如滤波片的设置; 2) 如果转染的是重组质粒,先用空白的质粒(无插入片段)作为对照,以确定检测方法正确; 3) 如果是重组质粒,对质粒与插入片段的连接处测序,确定阅读框正确; 4) 换一种转染细胞,常用的细胞有HeLa, COS, HEK293, CHO-K1, NIH3T3; 5) 优化转染条件,例如质粒量、转染
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