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-20℃保存
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Recombinant Aspartate Beta Hydroxylase (ASPH)
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
50ug/50ug
| 规格: | 50ug | 产品价格: | ¥2180.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50ug | 产品价格: | ¥3980.0 |
产品英文名称:Recombinant Aspartate Beta Hydroxylase (ASPH)
别名:BAH; CASQ2BP1; HAAH; JCTN; Junctin; Humbug; Junctate; Aspartyl/Asparaginyl Beta-Hydroxylase; Peptide-aspartate beta-dioxygenase
种属:Homo sapiens (Human)
蛋白序列:Leu345~Ile758
标签:N-terminal His Tag
Uniprot:Q12797
表达系统:Prokaryotic expression
来源:E.coli
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文献和实验是没有问题的. 2、表达重组蛋白时,细菌裂解方法都有哪些? 在表达重组蛋白时,诱导以后跑SDS-PAGE发现表达都很好,但是在裂解细胞时遇到问题。总是不能彻底裂解细胞。 首先我采用超声裂解,可是不管我如何超声总有部分细菌没有裂解。 我的超声条件如下:宁波新芝超声细胞破碎仪,功率400W,超5秒,间隔5秒,重复99次。然后显微镜观察,不彻底时再重复99次。菌体来自200 ml培养液,用20 ml PBS重悬。 然后我又尝试加溶菌酶,首先加至终浓度100 ug/ml,4C半小时菌液不变粘
重组蛋白,但也含有一些细菌成分,如一些外膜蛋白、质粒DNA和其它杂质。洗涤常用1%以下的中性去垢剂,如Tween、Triton、Lubel和 NP40等加EDTA和还原剂2-巯基苏糖醇(DTT)、β-巯基乙醇等反复多次进行,因去垢剂洗涤能力随溶液离子强度升高而加强,在洗涤包涵体时可加50 mM NaCL。这样提取的包涵体纯度至少可达50%以上,而且可保持元结构。也可用低浓度的盐酸胍或尿素/中性去垢剂/EDTA/还原剂等洗去包涵体表面吸附的大部分不溶性杂蛋白。洗涤液pH以与工程菌生理条件相近为宜
纯的包涵体 对于包涵体的纯化,包涵体的前处理是很重要的。 包涵体中主要含有重组蛋白,但也含有一些细菌成分,如一些外膜蛋白、质粒DNA和其它杂质。洗涤常用1%以下的中性去垢剂,如Tween、Triton、Lubel和 NP40等加EDTA和还原剂2-巯基苏糖醇(DTT)、β-巯基乙醇等反复多次进行,因去垢剂洗涤能力随溶液离子强度升高而加强,在洗涤包涵体时可加50 mM NaCL。这样提取的包涵体纯度至少可达50%以上,而且可保持元结构。也可用低浓度的盐酸胍或尿素/中性去垢剂/EDTA/还原
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