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-20℃保存
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12个月
- 英文名:
Recombinant Heat Shock Protein 90kDa Alpha B1 (HSP90aB1)
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
50ug/50ug
| 规格: | 50ug | 产品价格: | ¥2180.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50ug | 产品价格: | ¥3980.0 |
产品英文名称:Recombinant Heat Shock Protein 90kDa Alpha B1 (HSP90aB1)
别名:HSP90-BETA; HSP90B; HSPC2; HSPCB; HSP84; Heat Shock 90kD Protein 1,Beta; Heat shock 84 kDa
种属:Homo sapiens (Human)
蛋白序列:Leu401~Asp724
标签:N-terminal His Tag
Uniprot:P08238
表达系统:Prokaryotic expression
来源:E.coli
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文献和实验,或者可以表达以产生重组蛋白。pET-32α(+)载体系列用于表达与109 aa Trx•Tag™硫氧还蛋白融合的肽序列。它属于一种表达系统,可在其激活后产生所需的蛋白质。插入原核宿主细胞。原核细胞如大肠杆菌因为它们廉价,快速的生物量积累和简单的工艺规模扩大,因此是外源蛋白表达的首选宿主。在本文中,我们将重点总结这种在我们的实验室中使用的有用技术。表达后pET-32α(+)载体的构建,蛋白质表达和蛋白质纯化将在本文中详细描述。获得用于构建载体的外源DNA片段插入载体的DNA通常可以使用聚合酶链式反应(PCR
剂如Triton X-100、脱氧胆酸盐和低浓度的变性剂如尿素充分洗涤去除杂质,这一步很重要,因为大肠杆菌外膜蛋白Omp T(37 KDa)在4-8mol/L尿素中具有蛋白水解酶活性,在包涵体的溶解和复性过程中可导致重组蛋白质的降解。 对于尿素和盐酸胍的选择: 尿素和盐酸胍属中强度变性剂,易经透析和超滤除去。它们对包涵体氢键有较强的可逆性变性作用,所需浓度尿素8-10M,盐酸胍6-8M。尿素溶解包涵体较盐酸胍慢而弱,溶解度为70-90%,尿素在作用时间较长或温度较高时会裂解形成氰酸盐,对重组蛋白质的氨
Healthcare),经过简单的纯化之后我可以得到90%的目的蛋白。我的目的蛋白是一个大小为45kDa,可以通过二硫键形成反向平行二聚体(antiparallel homodimer)的糖蛋白,经过纯化,我通过一个细胞增殖实验(cell proliferation assay)检测了其活性,结果表明表达出来的蛋白在体外有完全的活性。并且我也在体外利用受体分析了蛋白结合活性,与对照(通过大肠杆菌和Bacular细胞未带tag的蛋白)相比,his-tag有一点副作用。 伊可丽:由于在摇瓶培养中巴斯德毕赤
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