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-20℃保存
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12个月
- 英文名:
Recombinant 15-Lipoxygenase-2 (15-LO-2)
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
50ug/50ug
| 规格: | 50ug | 产品价格: | ¥2180.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50ug | 产品价格: | ¥3980.0 |
产品英文名称:Recombinant 15-Lipoxygenase-2 (15-LO-2)
别名:ALOX15B; LOX15B; 15-LOX-2; Arachidonate 15-lipoxygenase type II; Lipoxygenase 15, Type B; 15-lipoxygenase 2; Linoleate 13-lipoxygenase 15-LOb Arachidonate-15-Lipoxygenase, Type B
种属:Rattus norvegicus (Rat)
蛋白序列:Asp349~Val633 (Accession # Q8K4F2)
标签:N-terminal His Tag
Uniprot:Q8K4F2
表达系统:Prokaryotic expression
来源:E.coli
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文献和实验【转帖】教你一种简单、高效的提高重组蛋白质的诱导表达量的方法
。 实验步骤: 1.设计目的重组蛋白质的N端10-15个氨基酸的简并序列。 2.引物合成上述简并序列,同时设计合成目的基因反向引物。 3.PCR扩展目的基因,这样在目的基因的5‘端就引入了兼并序列,同时不改变氨基酸序列。 4.双酶切,插入到目标载体。 5.转化。 6.挑选多个克隆(比如100-200个)到1.5ml EP管,直接诱导表达(记得带上为改造克隆菌株的对照)。 7.SDS-PAGE检测。 8.挑选高表达的多个克隆,测序。 怎么样?是不是很简单,不需要做太多的摸索
实验步骤 1. 制备包涵体 1) 取上述含目的蛋白菌液,4℃,6500 rpm 离心 15 min,弃上清; 2) 将沉淀完全重悬于 0.1 倍菌液体积的 1 × IB 洗涤液,反复混匀; 3) 在细胞裂解的过程中将重悬的溶液置于冰上以防止蛋白受热裂解,可选择超声波裂解或 French Press 法
范围,该例为0.1-1.0 mg/ml。这个浓度范围对于不同的细胞因子或重组蛋白是不同的。如重组人FGF-6(产品编号:100-30)为0.5-1.0mg/ml,而重组人Activin B(产品编号:120-15)则一定要是0.5mg/ml。 高于或低于该浓度范围会有什么问题呢? 答:首先,细胞因子或蛋白会不稳定,即很容易出现活性下降的现象。其次,高于这个浓度范围,可能会超过该蛋白的最大溶解浓度,即蛋白无法完全溶解。再者,高于或低于该浓度范围,蛋白可能会出现聚集(aggregation
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