Labcope 一次性抽取包装乳胶手套 中号 LC-STC-

原代细胞的培养与建系(一)

组织应加入含10%二甲基亚砜的培养基，按细胞冻存方式于液氮中冷冻保存。（2）取材应严格无菌 所取标本材料应在无菌条件下进行，为了确保无菌，对所取材料若疑有污染的可能，应将所取组织在含高浓度抗菌素（400单位/mL）甚至加入适量的两性霉素B或10%达克宁液的培养液内于4℃下存放2小时以上，再用PBS洗2~3次，以确保所取材料无菌。要用无菌包装的器皿或事先消毒好的带少许培养液（内含400单位/mL抗菌素）的小瓶等便于携带的物品来取材，所取材料应避免接触有毒有害的化学物质，如碘、汞等。（3）取材和原代

细胞培养技术

)；青霉素瓶(5毫升)；西力辛瓶(10毫升)；其它还有尖吸管和移液管，载玻片(厚度0．8～1．2毫米)，盖玻片(厚度0．12毫米)，贮存尖吸筒用的玻璃筒或金属筒，漏斗，烧杯，量筒，贮蒸馏水瓶，冷冻管(1．5毫升，2毫升)等。 2.塑料品 　　多孔培养板规格有4、6、12、24、96孔等，培养皿直径有3厘米、6厘米、10厘米等。塑料品经消毒灭菌密封包装，供一次性使用，重复使用的需经特殊方法清洗消毒。塑料器材厚薄均匀，有的表面经特殊处理，细胞易于生长。 3.器械

细胞问题解答集锦

。 (3)离心:按密度由低至高的顺序将配制的离心液各1ml分别缓缓加入10ml离心管，保持不同密度的液体不相互混合，不同液面之间有明显分层。将1ml单细胞悬液(细胞数约5x106) 缓缓加入离心液上层，4000r/min离心60min。 (4)LC判定:收集离心所得各层细胞，Hanks液洗2次，涂片，丙酮固定10min。采用鼠抗人CD1a单克隆抗体，按照免疫组化一般方法，进行免疫组化染色。胞膜呈棕黄色的为LC。 再附上langerhans细胞的一些背景资料： 人体langerhans’细胞(LC)来源