P 物质放免检测服务
P 物质放免试剂盒操作说明书
P 物质(S.P)为脑肠肽,分子量为 1347,广泛分布于神经系统和胃肠系统,由 APUD 系统的
EC1 肠嗜铬细胞分泌。S.P 具有多种生理功能,能够刺激和加速胃肠蠕动,刺激唾液和胰腺分泌,
减少胆汁分泌,刺激生长抑素、胰岛素和高糖素的释放,同时,S.P 还具有神经递质和调制因子的
作用。本测定盒用于血浆提取液、组织提取液,脑脊液中 S.P 含量的测定。
盒组成及配制:冻干品于-20℃保存,溶解后允许冻融一次。液体试剂 4℃保存。
1、缓冲液 1 瓶。
2、免疫沉淀剂(第二抗体)1 瓶。
3、生理盐水(含 0.5% BSA):自备。
4、抑肽酶 1 瓶 10%EDTA-Na2,自备。
5、标准品 2 瓶:1024pg/瓶,用前加缓冲液 1 ml/瓶溶解,然后倍比稀释成浓度
为 1024、25 6、128、64、32、16、8pg/ml 的标准。
6、S.P 抗体 2 瓶。
7、125 I - S.P 2 瓶。
8、牛血清白蛋白 0.5 克。
样品收集:
静脉血 3ml ,注入含 0.5M EDTA-Na2 30ul 和抑肽酶 1500 KIU 试管中 混匀,
离心血浆放-20℃保存,测前提取或提取后再置-20℃贮存。
血浆提取:
每 1ml 血浆加 2ml 冷丙-酮(4℃±),混匀,4℃离心,2000 转×20 分钟。取
上清加 4ml 冷石-油醚,混匀后再次离心。吸弃上相,下相用凉风(空调或电扇)将残
余丙-酮吹掉后所余液体用冷冻抽干机抽干。亦可用氮气或多头吹干器吹干。干燥后密
封保存(4℃可存一周,-20℃可保存 2—3 月)提取管(瓶)不能用塑料管(瓶)!!!。
组织的提取:
取大小适宜的组织快,立即称重于煮沸的生理盐水(1ml)中煮沸 3 分再加 1N 冰
醋酸 0.5ml 于匀浆器中匀浆提取,再用 1N NaOH 0.5 ml 中和,3000 转/分,15 分钟(最
好是低温离心)。取上清液贮存于-20℃以下待测,可保存 2-3 个月)。
注意事项:
有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
结果计算:
1. 以 N/T、B/T 计算 NSB、S0结合百分率,以 B/B0 计算标准及待测样品结合百分率,在半对数
坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动 r 计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标
准曲线及样品浓度。以各标准管 B/B0%与各标准管浓度的对数绘制曲线图,在图上查出各标本及回
收管含量。
2. 血浆样本测值÷4=待测血浆样本的 S.P 含量(pg/ml)(“4”为容积校正系数)
组织样本测值÷2=待测组织提取液 S.P 含量(pg/ml)。
3. 正常值:42.97±7.7 pg/ml。
本月盒参考数据:
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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