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-80℃
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90天
- 英文名:
pET21d-Ube1
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
0.5ug/0.5ug
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥1280.0 |
英文名称:pET21d-Ube1
货号:KM106703
图谱:微客服
宿主:大肠杆菌
用途:蛋白表达
片段类型:ORF
片段物种:人
原核抗性:Amp
真核抗性:
荧光标记:
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文献和实验真DNA聚合酶可能会导致此问题。大肠杆菌 BL21(DE3)中的蛋白质表达重组pET-32α(+)载体可以表达所需的蛋白质,其在被异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后与大肠杆菌 BL21(DE3)中的109aa Trx•Tag TM融合。首先,将含有100μg/ ml氨苄青霉素的10ml LB培养基与含有重组pET-32α(+)载体的新鲜细菌菌落一起接种37℃过夜; 然后,将500-μl过夜培养物加入到含有100-μg/ ml氨苄青霉素的30-ml新鲜LB培养基中,在37℃接种直至OD 600
最近在做原核表达,包涵体。以前也做过,但经验不多。一点失败的教训以及纯化过程中的体会,贴出来与大家共享,同时希望得到同行们的指正。 1. 首先介绍一下背景。载体是invitrogen公司的pET22b,Amp抗性。菌株是该公司的BL21 star DE3,是一个蛋白降解酶突变菌株,也就是说是一种优化表达菌株。 2. 第一次失败。第一次做诱导的时候,重复了很多次,但总是诱导不出来。PCR,酶切都正确。但没等测序结果出来就开始做了。失败了。曾在园子求助。后来证明是引物
最近在做原核表达,包涵体。以前也做过,但经验不多。从园子里也学到不少。一点失败的教训以及纯化过程中的体会,贴出来与大家共享,同时希望得到同行们的指正。1. 首先介绍一下背景。载体是novagen公司的pET22b,Amp抗性。菌株是Invitrogen的BL21 star DE3,是一个蛋白降解酶突变菌株,也就是说是一种优化表达菌株。2. 第一次失败。第一次做诱导的时候,重复了很多次,但总是诱导不出来。PCR,酶切都正确。但没等测序结果出来就开始做了。失败了。曾在园子求助。后来证明
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