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-80℃
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90天
- 英文名:
pCAG-T7pol
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
0.5ug/0.5ug
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥1280.0 |
英文名称:pCAG-T7pol
货号:KM104420
图谱:微客服
宿主:哺乳细胞
用途:蛋白表达
片段类型:ORF
片段物种:蛋白酶
原核抗性:Amp
真核抗性:
荧光标记:
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文献和实验基因研究中,敲除基因,研究该基因的功能是最常用的套路。一般 ShRNA 可通过 RNA 干扰来抑制基因的表达, 是基因研究中必不可少的环节。下面就主要围绕设计 ShRNA 引物序列,手把手教你构建 ShRNA 质粒,轻松敲基因。ShRNA 的设计原则1. 克隆到 ShRNA 表达载体中的 ShRNA 包括两个短反向重复序列,中间由一茎环序列分隔的,组成发夹结构,由 polⅢ 启动子控制。随后在连上 5~6 个 T 作为 RNA 聚合酶 Ⅲ 的转录终止子。2. 两个互补的寡核苷酸两端须带有
, 例如, 一种 H 1-RNA启动子, 一种 pol III 的三级启动子, 被用于质粒载体直接转录短的发卡状RNA随后进入细胞产生SiRNA。同样地,pol III 的 U6 启动子 也被用做产生短发卡状RNA或者正义和反义的 SiRNA。 短的发卡状RNA能摹拟自然状态产生 miRNA。然而,目前的关于设计和产生这样人工的短的发卡RNA来产生RNAi的数据依然没有统一的。 例如, 发卡环状部分的大小(例如说长于7个核苷)和序列在一个报告中被发现是非常重要的, 同时环较短(1,4,6个核苷)被其它人成功
RNase Protection Assay--RNA酶保护
the riboprobe linearize the appropriate template (5 m g) with the appropriate enzyme (5' overhang is best). Phenol/chloroform extract, EtOH ppt, wash and dry. Resuspend in 10 m l DEPC treated Q. • Mix the following: T7 SP6 6 m l DEPC Q 3 m l DEPC Q 2 m l 10
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