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-80℃
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90天
- 英文名:
LB1366 (Bcl-2 promoter with MHS1234)
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
0.5ug/0.5ug
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥1280.0 |
英文名称:LB1366 (Bcl-2 promoter with MHS1234)
货号:KM102855
图谱:微客服
宿主:哺乳细胞
用途:荧光素酶报告
片段类型:Promoter
片段物种:人
原核抗性:Amp
真核抗性:Hyg
荧光标记:
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文献和实验连接反应 (一)外源DNA和质粒载体的连接反应 外源DNA片段和线状质粒载体的连接,也就是在双链DNA5'磷酸和相邻的3'羟基之间 形成的新的共价链。如质粒载体的两条链都带5'磷酸,可生成4个新的磷酸二酯链。但如果质粒DNA已去磷酸化,则吸能形成2个新的磷酸二酯链。在这种情况下产生的两个杂交体分子带有2个单链切口,当杂本导入感受态细胞后可被修复。相邻的5'磷酸和3'羟基间磷酸二酯键的形成可在体外由两种不同的DNA连接
1 [60fmol (~100ng)]B外源插入片段2[60fmol (~10ng)]C和F载体1(60fmol)和外源插入片段3(60fmol)D线状载体(5’-磷酸化)(60fmol)G环状载体[60fmol (~10ng)]1 载体DNA已进行去磷酸化2 外源目的DNA可以连接接头。3 连接反应中,质粒载体和插入的DNA片段摩尔比一般为1:1。DNA的总浓度应约为10ng/μl。 a. A、B和C管中加入: 10×连接缓冲液 1.0μl T4噬菌体连接酶
Bethesda Res,Lab.出版的Focus第2卷,第2、3期合刊)从理论上探讨了DNA浓度对连接产物性质的影响。简而言之,环化的连接产物与多联体连接产物的比取决于两个参数:j和i。j是DNA分子的一个末端在同一分子的另一末端附近的有效浓度,j的数值是根据如下一种假设作出的:沉吟液中的DNA呈随机卷曲。这样,j与DNA分子的长度成反比(因为DNA越长,某一给定分子的两末端的越不可能相互作用),因此j对给定长度的DNA分子来说是一个常数,与DNA深度无关。j=[3/(3πlb0)]3/2其中l
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