- ￥680 - 1280
- KEMOBio
- 进口/国产
- KM102804
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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-80℃
- 保质期：
90天
- 英文名：
pTrcHis2A
- 库存：
100
- 供应商：
科淼生物
- 规格：
0.5ug/0.5ug
| 规格： | 0.5ug | 产品价格： | ￥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 0.5ug | 产品价格： | ￥1280.0 |
英文名称：pTrcHis2A
货号：KM102804
图谱：微客服
宿主：大肠杆菌
用途：蛋白表达
片段类型：ORF
片段物种：空载体
原核抗性：Amp
真核抗性：
荧光标记：
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文献和实验1、质粒的概念 质粒（Plasmid）是一种存在于细菌、酵母等微生物细胞中的小型环状双链 DNA 分子，能够独立于宿主染色体进行自我复制，并通常携带对宿主生存非必需但具有特定功能的基因（如抗生素抗性基因）。质粒是分子生物学和基因工程中最重要的工具之一。 质粒根据其用途可以分为多种不同的类型，如用于保存序列信息的克隆质粒（如：pUC 系列质粒），用于表达蛋白的质粒（如哺乳动物细胞表达所用的 pcDNA3.1 系列质粒），用于基因编辑的质粒（如哺乳动物细胞基因编辑所用的 espCas9-2A
遗传学方法(如DNA转化、基因置换等。[3])为了获得高稳定的外源蛋白表达菌株,巴斯德毕赤酵母表达载体连同外源基因通过同源重组整合至宿主染色体基因组座位上。对于图1所示的表达载体pPIC3,能以两种方式整合至染色体上。一种是在His4或5'AOX1 dNA片段的单酶切位点将质粒载体切成线性,通过单交换整合进染色体(图2A、B)。另一种用Bgl Ⅱ酶切此质粒载体,释放出包含AOX1末端序列的表达盒,与宿主染色体上的AOX1基因发生一步基因置换(图2C),这样得到的表达菌株为AOX1缺陷型,它们代谢
切成线性，通过单交换整合进染色体（图2A、B）。另一种用Bgl Ⅱ酶切此质粒载体，释放出包含AOX1末端序列的表达盒，与宿主染色体上的AOX1基因发生一步基因置换（图2C），这样得到的表达菌株为AOX1缺陷型，它们代谢甲醇的速度明显减慢，但有时表达外源蛋白的水平却比野生型菌株高得多，尤其表现在摇瓶培养β-半乳糖苷酶[3]、转化酶(invertase)[4]和乙肝病毒表面抗原上[5]。 与自主复制的质粒型表达载体不同，整合型表达载体的拷贝数可以有很大的变化。含多拷贝外源
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