- ￥680 - 1280
- KEMOBio
- 进口/国产
- KM101116
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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-80℃
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90天
- 英文名：
pSUMO-mut
- 库存：
100
- 供应商：
科淼生物
- 规格：
0.5ug/0.5ug
| 规格： | 0.5ug | 产品价格： | ￥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 0.5ug | 产品价格： | ￥1280.0 |
英文名称：pSUMO-mut
货号：KM101116
图谱：微客服
宿主：大肠杆菌
用途：蛋白表达
片段类型：ORF
片段物种：空载体
原核抗性：Kan
真核抗性：
荧光标记：
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文献和实验生质体法和电穿孔法转化效率最高，且有时可得到含多拷贝外源基因的转化子，有报道称电穿孔法的转化效率可高达105/μg。同时由于电穿孔法简便、快捷、高效，故是目前最理想的转化P.pastoris的方法。P.pastoris重组可分两种情况：一种是单交换，即在HIS或5′aox的单酶切位点将质粒载体线性化，通过单交换（插入）整合入染色体，这样由于aox1基因仍然保留，所得到的转化子表型为Mut+；另一种为双交换（或替换），即外源基因通过重组替换了染色体上的aox1基因，从而造成aox1的缺失，得到的转化
型石油酵母Y11430突变 而来，常用的3株宿主菌是GS115，KM71 和 MC1o0-3。GS115和KM71是Y1 1430的组氨醇脱氢酶基因(histidinol dehydrogenase gene，h/s4)缺失突变体，不能合成 H/s4，因此质粒载体需携带h/s4，转染后的阳性重组子可以用h/s4缺陷 (h/s4-)平板进行筛选，但是GS115和KM71存在一定的低频率自发回变，即重新变为h/s正常菌株，致使h/s4’平板筛选阳性重组子存在假阳性情况。GS115的启动子为P，在含甲
，都具有HIS4营养缺陷标记。其中，GS115茵株具有AOX1基因，是Mut＋，即甲醇利用正常型；而KM71菌株的AOX1位点彼ARG4基因插入，表型为Muts，即甲醇利用缓慢型，两种菌株都适用于一般的酵母转化方法。 毕赤酵母在20世纪70年代曾被用于生产单细胞蛋白，有很好的发酵基础，菌体密度可达100g/L干重。其生长培养液的组分包括无机盐、微量元素、生物素、氮源和碳源，廉价而无毒。它能在以甲醇为唯一碳源的培养基中快速生长，其中醇氧化酶AOX——甲醇代谢途径的关键酶可达细胞可溶性蛋白的30％
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