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90天
- 英文名:
pMSCVPuro-IRES-EGFP
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100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
0.5ug/0.5ug
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥1280.0 |
英文名称:pMSCVPuro-IRES-EGFP
货号:KM101994
图谱:微客服
宿主:哺乳细胞,逆病毒
用途:蛋白表达
片段类型:ORF
片段物种:空载体
原核抗性:Amp
真核抗性:Puro
荧光标记:绿色
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文献和实验naj2007 请教一下各位老师,在构建过表达载体的时候,VEGF和GFP是不是不可以做成融合蛋白,但是如果用不同的启动子的话,很容易丢失荧光,有没有什么解决方法。 zhujoker 可以做成融合蛋白的,即使是使用不同的启动子的话荧光也不那么容易丢失的,大不了你将荧光的启动子换成强的如CMV,EF1a之类。 kinguangjun 或者你可以用CMV-VEGF-IRES-GFP来做
-MEM、DMEM培养基和M-MLV逆转录酶;小牛血清;G418;DIG High PrimeDNA Labeling and Detection Starter Kit I1。 质粒 pGL3-promoter;含EBVR的质粒p220.2。 重组质粒载体pcDNA3-EGFP-EBVR的构建 采用StuI和XbaI消化p220.2,获得长4.7 kb的EBVR,包括EBV核抗原1(EBNA1)和OriP,克隆至pGL3-promotor的SV40启动子下游Hind Ill
1 、将转染后的细胞按照一定的比例接种到 6 孔板中(一般选用 1 : 10 和 1 : 100 两个梯度),分别采用 1200 m g/ml , 1000 m g/ml 和 800 m g/ml 的 G418 进行筛选; 以转染携带 EGFP 质粒载体的细胞作为阳性对照,以未转染质粒载体的细胞作为阴性对照; 2 、每 3 ~ 4 天换液一次; 3 、筛选 20 ~ 30 天,即可得到稳定表达细胞株; 4 、传代后,以一定的 G418 浓度
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