- ￥680 - 1280
- KEMOBio
- 进口/国产
- KM101317
- 2025年07月13日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-80℃
- 保质期：
90天
- 英文名：
pX260
- 库存：
100
- 供应商：
科淼生物
- 规格：
0.5ug/0.5ug
| 规格： | 0.5ug | 产品价格： | ￥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 0.5ug | 产品价格： | ￥1280.0 |
英文名称：pX260
货号：KM101317
图谱：微客服
宿主：哺乳细胞
用途：基因敲除
片段类型：CRISPR
片段物种：空载体
原核抗性：Amp
真核抗性：Puro
荧光标记：
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文献和实验和EcoRI消化去除OriP片段，T 连接酶连接，构建得到重组质粒载体pcDNA3-EGFP-EBNA1MAR。 质粒纯化和鉴定 所得质粒按质粒纯化试剂盒要求进行抽提纯化。测定光密度值(D260nm )，鉴定质粒的量和纯度，酶切，电泳鉴定。 细胞转染 细胞株COS-7在含10％ 小牛血清的DMEM培养液、5％CO 、37℃ 恒温箱中培养。用阳离子脂质体Lipofectamine 2000介导质粒pcDNA3-EGFP.EBVR和pcDNA3.EGFP.EBNA1.MAR转染
的步骤，节省时间和开支。 缺点：有可能引发非特异性的基因沉默，尤其是同源或者密切相关的基因。 适用于：快速而经济地研究某个基因功能缺失的表型 不适用于：长期研究项目，或者是需要一个特定的siRNA进行研究 评价：★★★☆☆ 4．编码shRNA的载体生产siRNA 优点：制备质量可控性好，带有抗生素标记的载体可以在细胞中持续抑制靶基因的表达，持续数星期甚至更久，可以大量扩增。 缺点：转录后的shRNA的正确折叠率不能保证，有可能因此造成非特异性抑制，质粒载体转染效率不稳定，与细胞
基因整合到病毒载体中，尤其适用于从大量表达产物中检测出目的蛋白。 根据进入宿主细胞的方式，可将表达载体分为病毒载体与质粒载体。病毒载体是以病毒颗粒的方式，通过病毒包膜蛋白与宿主细胞膜的相互作用使外源基因进入到细胞内。常用的病毒载体有腺病毒、腺相关病毒、逆转录病毒、semliki森林病毒(sFv)载体等。另外，杆状病毒载体应用于哺乳动物细胞的表达在近几年颇受重视，这是因为它与其它病毒载体相比有特有优势，如可通过昆虫细胞大量制备病毒颗粒；可感染多种哺乳动物细胞，但在细胞内无复制能力，生物安全度高；可插入高达
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