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文献和实验Cell 子刊:郭尚勤团队报道荧光计时器,可实时监测活细胞周期速度
细胞的分裂与增殖是细胞生命活动的基本过程之一。无论是在发育过程中的细胞分化、再生、重编程,还是在许多疾病,包括癌症的发生过程中,细胞周期的快慢都有可能发生改变。 因此,测定细胞分裂周期的速度或长度,尤其是在组织甚至体内对细胞分裂的周期进行测定,能够帮助我们更好地理解发育过程和疾病的发生过程,在基础研究中有着重要的意义。然而现有的细胞周期测定技术有其局限性,在活体内实时监测细胞周期的动态变化仍存挑战。2020 年 6 月 23 日,来自耶鲁大学的郭尚勤团队与合作者在 Cell Reports
1 应用说明 编码β-半乳糖苷酶(Gal)的基因已商业化地运用到报告基因研究的各种层面,重组的β-Gal已得到成熟的运用,以此用来研究启动子的功能、组织特异性表达、发育调控、mRNA的稳定性以及各种细胞器靶向蛋白的信号序列。应用β-Gal来测定启动子和基因的活性具有双重优点;检测方法简单,用于酶活性分析的底物容易获得,使用TBS-380微型荧光计对溶液中β-Gal活性进行
碱性磷酸酶检测法( AKP 法) 1. 按 MTT 法用细胞因子处理靶细胞适当时间,用 PBS 洗去死亡细胞,洗两次。 2. 向 96 孔细胞培养板各孔中加 0.2ml 新鲜配制的底物液( 0.2mol/L 硼酸, 1mmol/L MgCl2 , 1.2mmol/L 甲伞基磷酸)。在 37 ℃ 5 % CO2 的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养 3 小时。 3. 在荧光计数仪上测定荧光的量。根据测定已知











