Npercell™ 酶是一种来源于Fusarium oxysporum的胰蛋白酶样蛋白酶, 该酶是从大肠杆菌中表达纯化而来。该酶与胰蛋白酶的酶切位点和pH活性范围一致,能对蛋白序列中精氨酸和赖氨酸的羧基端进行切割。 Npercell™ 酶在细胞实验中已被证明可以有效地解离贴壁生长哺乳动物细胞系,具有与猪胰蛋白酶相似的解离动力学,并表现出较低的细胞毒性。细胞复制、增殖动力学和长期维持可与动物胰蛋白酶收获的细胞一致。纯度分析表明,Npercell™ 酶相较于传统胰蛋白酶,无需使用胰蛋白酶抑制剂来灭活,纯度更高,分子更加稳定,活性保持更加优异。 Npercell™ 酶用途:用于贴壁培养细胞消化 1.用于组织块的消化解离,获取原代细胞; 2.用于贴壁细胞的传代消化; 3.用于微载体方法培养的细胞消化; 贮藏条件及效期: 储存条件: 4℃避光保存,24 个月稳定
细胞消化实验
方法(HEK293FT细胞为例):
本实验中T25培养的HEK293FT细胞去培养基后,使用10mL PBS洗一次,加入1.7mL胰酶,于37℃消化3min。使用8.3mL完全培养基中和胰酶,将细胞吹散后使用细胞计数仪检测细胞数和活率。然后将1 ×106个细胞传代到新的T25培养瓶中观察细胞贴壁情况。
图1 . 消化过程及传代24h细胞贴壁图片: 两种胰酶消化后,细胞24h贴壁状态良好,二者没有明显差异
Npercell™ 产品信息
Npercell™酶 检测结果
项目 |
描述 |
序列来源 |
Fusarium oxysporum |
外观 |
透明 |
分子量 |
22kda |
纯度(尺寸排阻色谱) |
≥95% |
比活* |
≥27,000 U/mg |
细菌内毒素 |
<5 EU/ml |
宿主蛋白残留 |
<10 PPM |
最适 pH |
7.0-7.4 |
储存温度 |
2-8℃ |
酶活性单位定义:25,pH 7.6,反应体系3.2 mL(1cm 光路)每分解BAEE (N-BenzoylL-Arginine-Ethyl ester)使253nm 波长吸收值增加0.003 定义为一个活力单位(Unit/mg protein(2020 版《中国药典》
图 2. SEC-HPLC 酶纯度检测(纯度为 99.28%)
订购信息
产品名称 |
规格 |
货号 |
单位 |
目录价格 |
Npercell™ 酶 消化液 |
100ml(1X) |
BS-1306 |
瓶 |
280 |
500ml(1X) |
BS-1307 |
瓶 |
550 |
100ml(10X) |
BS-1308 |
瓶 |
630 |
500ml(10X) |
BS-1309 |
瓶 |
2500 |