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99
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联硕生物
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现货
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5米/卷
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文献和实验将包涵体悬浮在下述溶液中,4℃振荡过夜。 100mM Tris 50mM Glycine 8.5M 尿素 溶液用HCl调节到pH 8.0后加入 25mM DTT 6000RPM离心,取上清,去除不溶解物。 包涵体蛋白的复性 将溶解的包涵体装入透析袋,在4℃下将透析袋浸入下列溶液依次透析: 0.1M Tris 0.4M L-Arginine 1 mM EDTA 0.2mM PMSF 4M 尿素 溶液pH调节到8.0 透析24小时 0.1M Tris
直接用无菌水保存,每周换一下液体,应该没有问题。 看看说明书不就结了!我原来在CRO的时候一直是重复用的,也没见什么不好啊!短期会用的话,用20%的乙醇泡着,回头拼命用millipore的水充干净,然后在用样品缓冲液平衡一下就好,至于有些人说的改变孔径,也没那么大影响的,你至少跟目的蛋白分子量差别3倍的截留分子量才安全的不是吗?1个月以内不用的话,建议用100mM的NaOH保存!更长时间的话加0.02%的叠氮钠,但那个东西强致癌物,不建议使用。 理论上截留目标物,孔径应选
沉淀蛋白质。例如人血浆蛋白的乙醇分级沉淀。4、透析。根据目的蛋白质、多肽的分子量,选取适宜的透析袋进行透析,可以起到更换缓冲液以及去除一些低分子杂质的目的。5、超滤。根据目的蛋白质、多肽的分子量,选取适宜截留分子量(MWcutoff)的超滤膜进行超滤。6、真空冷冻干燥。利用在低温和高真空条件下,冰不经融化为液态水而直接升华为水蒸气的原理。可以很好地浓缩样品和保存蛋白质、多肽的生物活性。7、变性沉淀。根据目的蛋白质、多肽对于温度或者酸碱性的耐受性,在较高的温度或者较极端的pH条件下处理样品,使杂质去除的方法
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