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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
见瓶身
- 保质期:
见瓶身
- 英文名:
10% SDS-PAGE彩色凝胶快速制备试剂盒
- 库存:
现货
- 供应商:
麦格生物
- CAS号:
无
- 规格:
50块
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文献和实验相关专题 SDS-PAGE电泳可用于分离蛋白质和核苷酸 ,这里综述了SDS-PAGE实验原理、试剂和器材、以及实验操作步骤。 一. 实验原理: SDS-PAGE是对蛋白质进行量化,比较及特性鉴定的一种经济、快速、而且可重复的方法。该法是依据混合蛋白的分子 量不同来进行分离的。 SDS是一种去垢剂,可与蛋白质的疏水部分相结合,破坏其折叠结构,并使其广泛存在于一个广泛均一的溶液中。SDS蛋白质复合
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量(垂直板型电泳)(图)
,可用下式表示:因此,测定某个蛋白质的分子量,只需比较它和一系列已知分子量的蛋白质在SDS-凝胶电泳时的迁移率就可以了。后来,Weber等人基本按Shapiro的方法对约40种蛋白质进行了研究,进一步证实了这个方法地可行性(见图16-1)。用这种方法测定蛋白质的分子量,简便、快速,只需要廉价的设备和微克量的蛋白质样品;所得结果,在分子量为15,000~200,000的范围内,与用其他方法测得的分子量相比,误差一般在±10%以内。因此,近几年来,SDS-凝胶电泳测定分子量的方法,已得到非常广泛的应用
。我们推荐按照制造商的说明进行操作。应使用还原型凝胶,除非抗体数据表中推荐使用非还原性条件。凝胶百分比取决于蛋白质的大小:4~40 kDa12~45 kDa10~70 kDa15~100 kDa25~200 kDa20%15%12.5%10%8%四、将蛋白质从凝胶转移到膜上如下制备转移堆叠体:膜可以是硝酸纤维素或 PVDF,两者各具优点。用甲醇「活化」PVDF 1 分钟,并在制备堆叠体之前用转膜缓冲液冲洗 PVDF。可能需要对时间和电压进行一些优化。我们推荐按照制造商的说明进行操作。可在封闭步骤之前
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