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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
55
- 生长状态:
贴壁生长
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 规格:
T25培养瓶
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 大鼠滑膜成纤维细胞 | T25瓶 | LZ-YX9743 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| APOL1 Others Human 人 APOL1 / apolipoprotein L1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | 人真皮成纤维母细胞-HDF-a |
| FGF14 Protein Canine 重组狗 FGF14 / SCA27 蛋白 | 儿茶酚氧化酶PPO抗体 |
| 人低分化肺腺癌细胞;GLC-82 [GLC82] | 内皮素受体A抗体 |
| NGFR Others Mouse 小鼠 NGFR / P75 人细胞裂解液 (阳性对照) | 免疫球蛋白超家族成员6抗体 |
| GES-1人胃上皮细胞 Human gasic epithelial cell GES-1 1640+10% FBS | 10号染色体开放阅读框30抗体 |
| 人脑血管周细胞 (HBVP) ( 5×105 ) 人脐静脉平滑肌细胞 MDA-MB-231(ATCC来源), 人癌细胞 | 原癌基因丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶MOS抗体 |
| IL1R1 Others Mouse 小鼠 IL1R1 / CD121a 人细胞裂解液 (阳性对照) | 皮肤T细胞虏获趋化因子抗体 |
| NCI-H520(人肺鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2 A549 [A-549](肺癌细胞) | 肿瘤/抗原家族4亚型7抗体 |
| CXADR Others Human 人 CXADR / CAR 人细胞裂解液 (阳性对照) | 去整合素样金属蛋白酶19抗体 |
| Beta-TC-6(小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞) 5×106cells/瓶×2 人淋巴成纤维细胞HLF | 神经细胞引领蛋白Nav1抗体 |
| VSIG4 Others Human 人 VSIG4 人细胞裂解液 (阳性对照) | 白喉酰胺生物合成样蛋白2抗体 |
| CL-0448SW 1990(人胰腺癌细胞)5×106cells/瓶×2 | 巨细胞病毒UL49蛋白抗体 |
| 大鼠滑膜成纤维细胞IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照) | 9号染色体开放阅读框91抗体 |
| 绵羊肺细胞;OAR-L1 | 驱动蛋白KNS1抗体 |
| CGB5 Others Human 人 CGB5 人细胞裂解液 (阳性对照) | 21号染色体开放阅读框25抗体 |
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
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文献和实验丁香园网友hyong915的观点为:成纤维细胞培养(一) 原代培养1、在手术室无菌条件下,切取新鲜的皮肤,增殖性瘢痕和瘢痕疙瘩组织,修除表皮和皮下组织,盐水反复冲洗后放入含PS的DMEM培养液内带回无菌工作间。2、把组织块置于培养皿内,Hank,s液漂洗三遍后吸净Hank,s液,眼科剪反复剪切组织块成0.5-1mm3大小。用弯头吸管吸取组织块接种于40ml培养方瓶瓶壁上,组织块间留约0.3-0.5cm的间距。3、 塞好瓶塞,放入37℃电热恒温培养箱内3.5小时使培养的组织小块微干涸
liupeizc 请问哪位高手知道成纤维细胞的生长周期啊,更确切的是血管外膜成纤维细胞生长周期,谢谢! zhujoker 估计都没人做过,你如果需要观察其生物学功能,就自己做一次,也算原创了啊! freecell 这里有: http://www.currentprotocols.com/protocol/cb0201 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意
构成纤维性结缔组织的重要成分。观察组织切片,可见这些细胞具有长而扁平的外形,常有不规则的突起。细胞质内含有线粒体、高尔基体、中心体、微脂肪粒等、其他无特殊的分化。细胞核呈椭圆形,有明显的核仁,细胞核染色性差。常与胶原纤维紧密相连,因与胶原纤维的形成有关故称为成纤维细胞。对动物细胞进行培养,不管细胞取自何处组织,因常常出现外表上和上述细胞非常相似的细胞,所以不论以后是否形成原来定义的胶原纤维,习惯上都称为成纤维细胞。但是在培养中所见的所谓成纤维细胞中也有不少会继续形成原来定义
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