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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
30
- 生长状态:
贴壁生长
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 规格:
T25培养瓶
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 大鼠甲状腺滤泡上皮细胞 | T25瓶 | LZ-YX9677 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| CM-H043人肝实质细胞完全培养基100mL | 人牙龈成纤维细胞HGF |
| 人胚肺成纤维细胞;HFL-I | 蛋白酶体PSMβ7抗体 |
| CM-H015人支气管成纤维细胞完全培养基100mL | 内皮细胞分化鞘脂G蛋白偶联受体1抗体 |
| SK-N-MC细胞,人神经上皮瘤细胞 蜡样芽孢杆菌 人肾小球内皮细胞RNAHRGEC miRNA5 μg | 干扰素调节因子3 |
| KiMA(人胚肾上皮细胞系) 5×106cells/瓶×2 艰难梭菌Closidium difficile | 19号染色体开放阅读框47抗体 |
| EPHA3 Others Mouse 小鼠 EphA3 (aa 569-984) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | DNA修复甲基敏感性基因19抗体 |
| RT4细胞,膀胱癌细胞 人胚肺细胞,MRC-5细胞 原代平滑肌细胞特制基础无血清培养基Many types of cells包装:500/100ml | C型尿肽抗体 |
| HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Ohio/UR06-0091/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) | 生长因子受体结合蛋白2相关接头蛋白2抗体 |
| FSTL1 Others Human 人 FSL1 人细胞裂解液 (阳性对照) | ADP核糖基化因子结合蛋白1抗体 |
| Promocell C-22110 Endothelial Cell GrowthMedium KIT, 内皮细胞生长培养基套装 500ml | 核蛋白易位启动子区域TPR抗体 |
| CFR Others Human 人 CFR / CFR-alpha 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | 肝癌新基因3蛋白抗体 |
| CL-0396NCI-H226(人肺鳞癌细胞)5×106cells/瓶×2 | 类状瘤病毒58 E6蛋白抗体 |
| 大鼠甲状腺滤泡上皮细胞SERPINB1 Others Human 人 SerpinB1 / ELANH2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | 7号染色体开放阅读框50抗体 |
| 巨噬细胞培养基MaM | 组蛋白H3K9甲基转移酶4抗体 |
| CL Others Human 人 CL-1 / CL / Chymoypsin-like protease 人细胞裂解液 (阳性对照) | 21号染色体开放阅读框2抗体 |
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文献和实验相关实验
1. Wistar 大鼠血细胞计数 2. SD 大鼠血细胞计数
培养了快一个月的细胞了,今天终于鉴定出是我想要的血管平滑肌细胞。我养的是大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞,采用的是组织贴块法培养。10天后传第一代(图1),16天后第二代(图2),22天后第三代(图3),并做a-actin免疫细胞化学鉴定(图4)。 图1图2图3 图4典型的血管平滑肌细胞生长"hill and valley"现象。
chenke520520 本人做转染实验,由于小鼠的细胞实在是养不活,我能否将小鼠的insig-1基因(insulin induce gene-1)转染到大鼠细胞中?能否其发挥功能?急!请战友们解答!谢谢! shao74 可以。 你是需要稳定表达还是瞬间表达?若稳定表达,你可采取病毒感染的方式,如曼病毒;逆转录病毒和腺病毒;若后者你可用一般的转染方式就够了,这样一般可持续7天左右。 hustokyo
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