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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
42
- 生长状态:
贴壁生长
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 规格:
T25培养瓶
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 小鼠表皮角化细胞 | T25瓶 | LZ-YX9377 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| CL187/CCL187细胞,人大肠癌细胞 人黑色素瘤细胞,M14细胞 人多发性骨髓瘤细胞;RPMI-8226 [RPMI8826] | 人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞;M619 |
| 人胚胎肺成纤维细胞;WI-38 | 氧化应激反应蛋白1抗体 |
| 人脑膜细胞完全培养基 100mL | 酸化真核翻译起始因子4B抗体 |
| NRK大鼠肾细胞 In NRK rat kidney cells DMEM培养基+10%FBS | 透明质酸酶/玻璃酸酶抗体 |
| 人膀胱平滑肌细胞(HBdSMC)( 5×105 ) 人绒毛膜毛细血管内皮细胞 Human | 碳酸酶9抗体 |
| CHODL Others Mouse 小鼠 CHODL / CHOndrolectin 人细胞裂解液 (阳性对照) | 脂蛋白脂酶抗体 |
| MCF-7(OLD)细胞,人癌细胞 小鼠肾癌细胞,RenCa细胞 HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮细胞 | 卵巢癌抗原抗体 |
| TIMP1 Others Mouse 小鼠 TIMP1 / TIMP / CLGI 人细胞裂解液 (阳性对照) | G蛋白结合蛋白6体 |
| L1210(小鼠白血病细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 IL1RL1 / ST2 人细胞裂解液 (阳性对照) | 水通道蛋白5抗体 |
| HCC1937(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0377LLC-WRC 256(大鼠腹水癌细胞)5×106cells/瓶×2 恒河猴肾细胞;LLC-MK2 | 苯甲酸肽水解酶抗体 |
| SPG21 Others Human 人 SPG21 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | 清道夫脱帽酶/热休克蛋白1抗体 |
| CL-0096HCT 116(人结肠癌细胞)5×106cells/瓶×2 | GLP-1单克隆抗体 |
| 小鼠表皮角化细胞人肾小球内皮细胞 (HRGEC)( 5×105 ) | 肿瘤/抗原2.2抗体 |
| 非洲绿猴肾细胞;BS-C-1 | 干扰素-gamma受体2抗体 |
| IFNA4 Others Mouse 小鼠 IFNA4 / IFNα4 / Ierferon alpha-4 人细胞裂解液 (阳性对照) | 丙型肝炎NS2反式调节蛋白/衰老相关的基因10蛋白抗体 |
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
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文献和实验「没爹」小鼠来了!科学家只用 1 个卵细胞培育出健康小鼠,还可正常繁殖后代
mammalian oocytes 的研究论文,通过基因编辑技术,他们探索了靶向表观遗传改造是否可以改善哺乳动物的孤雌生殖。他们的研究结果证明,在对 ICRs 进行基因编辑改造之后,能够直接从单个未受精的小鼠卵母细胞产生可存活的足月后代。 本研究报道的哺乳动物的孤雌生殖,是单性生殖的重要科学进步。 图片来源:PNAS 主要研究内容 研究人员指出,由于基因组印记的存在,先前旨在产生哺乳动物孤雌生殖后代的研究工作均失败了。因此,研究人员首先采用了不同的方法尝试去克服这个问题。 他们从雌性小鼠身上取出
小鼠腹水及单细胞悬液制备流程 配制 6% 淀粉肉汤。 6% 淀粉肉汤配制方法:牛肉膏 0.3g、蛋白胨 1.0g、氯化钠 0.5g、蒸馏水 100mL,上述材料混合加热后加入可溶性淀粉 6.0g;溶解后,121℃ 高压灭菌 15~20 min,EP 管分装封口,将肉汤放置于 4℃ 保存。 小鼠腹腔注射 1mL 6% 淀粉肉汤(注意避开肠管和内脏),刺激 60~72h。 颈椎脱臼法处死小鼠,用 75% 酒精浸泡小鼠 5min。 将小鼠置于解剖板中,固定四肢,剪开皮肤,充分暴露腹膜。 用眼
小鼠外周血单细胞悬液制备 采集小鼠外周血样本于抗凝管中。 离心管内加入 100 μL 新鲜血,加入 1 Test 对应流式抗体,混匀,4℃ 避光孵育 30 min。 加入 2 mL 1×红细胞裂解液,混匀,4℃ 裂解 5 min。 300 g 离心 5 min(裂解完立即离心,防止时间过长损伤细胞),弃上清可得到白色的细胞沉淀。 PBS 洗涤一遍。 加入 200 μL 细胞染色缓冲液重悬细胞,用流式细胞仪进行检测和分析。 注意事项: 采血用抗凝管,有肝素和 EDTA 两种,若直接裂解
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