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- 详细信息
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
24
- 生长状态:
贴壁生长
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 规格:
T25培养瓶
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 小鼠角膜基质细胞 | T25瓶 | LZ-YX9320 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| 安西他滨 盐酸盐10212-25-6 | Ancitabine hydrochloride |
| 胆红素635-65-4 | Bilirubin |
| (-)-表没食子儿茶素没食子酸酯989-51-5 | (-)-Epigallocatechin gallate |
| 儿茶素7295-85-4 | Catechin |
| (+)-儿茶精154-23-4 | (+)-catechin |
| (+)-儿茶素 水合物225937-10-0 | (+)-Catechin hydrate |
| 反式-阿魏酸537-98-4 | trans-Ferulic acid |
| (-)-表儿茶素490-46-0 | (-)-Epicatechin |
| (-)-表儿茶素没食子酸酯1257-08-5 | 小鼠角膜基质细胞(-)-Epicatechin gallate |
| 胃蛋白酶 来源于猪胃粘膜9001-75-6 | Pepsin from porcine gastric mucosa |
| 胆钙化醇67-97-0 | Cholecalciferol |
| 维生素 B1268-19-9 | Vitamin B12 |
| 生物素58-85-5 | Biotin |
| 右泛醇81-13-0 | D-Panthenol |
| 维生素 A 醋酸酯127-47-9 | Retinyl acetate |
| 维生素E醋酸脂58-95-7 | (+)-α-Tocopherol acetate |
| 维生素 K2863-61-6 | Vitamin K2 |
| DL-α-生育酚10191-41-0 | DL-α-Tocopherol |
| 吡哆素65-23-6 | Pyridoxine |
| 维生素A酸302-79-4 | Retinoic acid |
| 烟酸59-67-6 | Nicotinic acid |
| 吡哆素 盐酸盐58-56-0 | Pyridoxine hydrochloride |
| (-)-核黄素83-88-5 | (-)-Riboflavin |
| L-抗坏血酸钠134-03-2 | (+)-Sodium L-ascorbate |
| DL-α-生育酚醋酸酯7695-91-2 | DL-α-Tocopherol acetate |
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
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