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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
39
- 生长状态:
贴壁生长
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 规格:
T25培养瓶
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 小鼠胰岛beta细胞 | T25瓶 | LZ-YX9220 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| 三(羟甲基)甲基甘氨酸 | Tricine |
| 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺 盐酸盐25952-53-8 | N-(3-Dimethylaminopropyl)-N′-ethylcarbodiimide hydrochloride |
| 1,4-哌嗪二乙磺酸5625-37-6 | 1,4-diethanesulfonic acid |
| 1,4-哌嗪二乙磺酸 倍半钠盐100037-69-2 | PIPES sesquisodium salt |
| 乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸67-42-5 | Ethylene glycol-bis(2-aminoethylether)-N,N,N′,N′-tetraacetic acid |
| 4-吗啉乙磺酸4432-31-9 | MES |
| 2-(N-吗啉基)乙磺酸 4-吗啉乙磺酸 一水合物145224-94-8 | MES monohydrate |
| n-tetradecylphosphocholine77733-28-9 | Ethanaminium,2-[[hydroxy(tetradecyloxy)phosphinyl]oxy]-N,N,N-trimethyl-, inner salt |
| 细胞生物学 | |
| 二磷酸腺苷54447-84-6 | c-di-AP sodiu salt |
| Angiotensin II (3-8), human12676-15-2 | Angiotensin II (3-8), human |
| 京尼平苷酸27741-01-1 | Geniposidic acid |
| 果胶酶9032-75-1 | Pectolyase |
| 丹酰尸胺10121-91-2 | Dansylcadaverine |
| DL-噻吩76721-89-6 | DL-Thiorphan |
| 5-羟色胺盐酸盐153-98-0 | Serotonin hydrochloride |
| L-亮氨酸-7-氨基-4-甲基香豆素 盐酸盐62480-44-8 | L-Leucine-7-amido-4-methylcoumarin hydrochloride |
| 玉米烯酮17924-92-4 | Zearalenone |
| 小鼠胰岛beta细胞Tyr-Tyr-Tyr7390-78-5 | Tyr-Tyr-Tyr |
| L-蛋氨酸亚砜酰亚胺15985-39-4 | L-Methionine sulfoximine |
| 辛卡利特25126-32-3 | Sincalide |
| 橄榄油8001-25-0 | Olive oil |
| L-犬尿氨酸2922-83-0 | L-Kynurenine |
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
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文献和实验【求助】细胞里的beta catenin 好检测吗?? 用 western blot
antonio2001 细胞里的beta catenin 好检测吗?? 用 western blot 和免疫细胞化学 ?? 2008851029 细胞里的beta-actin非常好检测(我用的是ST的抗体) littlebee83325 什么细胞呢?胞浆蛋白么? magichunter beta catenin 好检测,细胞全蛋白裂解液上样20uL(15
beta actin is a type of cell skeleton protein.Its gene is a house keeping gene.In most of cells,beta actin,such as human skeleton,is expressed in a certain level.THat is the reason that people use beta-actin as the criteria of cell numbers
fengtingting2010 小鼠T细胞中beta-Actin的含量是多少啊,我要算小鼠T细胞中Foxp3的含量,如何知道呢?还有Western blot的抗体最适的稀释度如何确定,是全部做完后,拍片才能确定吗?一般加的抗体的体积是固定的吗?是10ul吗? fengtingting2010 如果上样量是20ug,体积是10ul。一抗和二抗的稀释度和体积如何确定呢?如何知道目的蛋白的丰度?万一目的蛋白的量仅在ng级别
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