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- 文献和实验
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- 保存条件:
Sealed in dry,Room Temperature
- 保质期:
2年
- 英文名:
2-(2-(4-(3-(2-(Trifluoromethyl)-9H-thioxanthen-9-ylidene)propyl)piperazin-1-yl)ethoxy)ethanol dihydrochloride
- 库存:
999
- 供应商:
北京康瑞纳生物科技有限公司
- CAS号:
1535-17-7
- 规格:
100mg
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文献和实验离子与蛋白质部分结合,具有保护蛋白质不易变性的优点,因此在提取液中加入少量NaCl等中性盐,一般以0.15摩尔。升浓度为宜。缓冲液常采用0.02-0.05M磷酸盐和碳酸盐等渗盐溶液。(二)有机溶剂提取法一些和脂质结合比较牢固或分子中非极性侧链较多的蛋白质和酶,不溶于水、稀盐溶液、稀酸或稀碱中,可用乙醇、丙酮和丁醇等有机溶剂,它们具的一定的亲水性,还有较强的亲脂性、是理想的提脂蛋白的提取液。但必须在低温下操作。丁醇提取法对提取一些与脂质结合紧密的蛋白质和酶特别优越,一是因为丁醇亲脂性强,特别是溶解
问题: 原因 解决办法 DNA完全没有被内切酶切割: 1) 内切酶失活 标准底物检测酶活性 2) DNA不纯,含有SDS,酚,EDTA等内切酶抑制因子 将DNA过柱纯化,乙醇沉淀DNA 3) 条件不适(试剂、温度) 检查反应系统是否最佳 4) DNA酶切位点上的碱基被甲基化 换用对DNA甲基化不敏感的同裂酶酶解,重新将质粒DNA转化至dcm-,dam-基因型的细菌菌株 5) DNA酶切位点上没有甲基化(如Dpn I) 换用不同切割非甲基化位点
碱性的提取液。 2、盐浓度 稀浓度可促进蛋白质的溶,称为盐溶作用。同时稀盐溶液因盐离子与蛋白质部分结合,具有保护蛋白质不易变性的优点,因此在提取液中加入少量NaCl等中性盐,一般以0.15摩尔。升浓度为宜。缓冲液常采用0.02-0.05M磷酸盐和碳酸盐等渗盐溶液。 二、有机溶剂提取法 一些和脂质结合比较牢固或分子中非极性侧链较多的蛋白质和酶,不溶于水、稀盐溶液、稀酸或稀碱中,可用乙醇、丙酮和丁醇等有机溶剂,它们具的一定的亲水性,还有较强的亲脂性、是理想的提
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