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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
RT/2-8℃/-20℃
- 保质期:
3年
- 英文名:
CALCEIN-AM
- 库存:
999
- 供应商:
北京康瑞纳生物科技有限公司
- CAS号:
148504-34-1
- 规格:
1mg
Calcein AM 钙黄绿素乙酰甲酯 148504-34-1 Calcein AM 钙黄绿素乙酰甲酯 148504-34-1
产品名称:Calcein AM 钙黄绿素乙酰甲酯 148504-34-1
产品编号:B3494
中文别称 钙黄绿素乙酰甲酯
英文别称 Calcein, AM
CAS 148504-34-1
分子式 C46H46N2O23
分子量 994.86
储存条件 -20°C干燥避光保存, 保质期 1年
纯度 ≥90%(HPLC)
性状 白色或浅黄色晶体
包装 瓶
规格 1mg
Calcein, AM是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂,它穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成Calcein,从而被滞留在细胞内,发出强绿色荧光。与其它同类试剂(如 BCECF, AM和CFDA)相比,Calcein, AM的细胞毒性很低。Calcein的激发和发射波长分别为 490 nm和515 nm。
Calcein, AM仅对活细胞染色。作为核染色染料的PI 不能穿过活细胞的细胞膜,它穿过死细胞膜的无序区域而到达细胞核,并嵌入细胞的 DNA双螺旋从而产生红色荧光(激发:535 nm,发射:617 nm),因此 PI 仅对死细胞染色。由于 Calcein和PI-DNA 都可被490 nm激发,因此可用荧光显微镜同时观察活细胞和死细胞。用545 nm激发,仅可观察到死细胞。根据以上特点,Calcein, AM和PI 经常被结合用来作为活细胞和死细胞的双重染色。
由于不同细胞系的最佳染色条件不同,我们建议个别确定Calcein, AM 和PI的合适浓度。
操作说明:
(1)用DMSO 制备1 mM 的Calcein, AM溶液,并用PBS 将其稀释制成1~50μM的Calcein, AM溶液①。
(2)将1/10 细胞培养基体积的Calcein, AM溶液加入到细胞培养基中②。
(3)在37℃培养细胞15~30分钟。
(4)用PBS 或适当的缓冲液洗涤细胞两次。
(5)用490 nm激发波长,515 nm发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。
注意:
如果Calcein, AM很难进入细胞,可以使用表面活性剂,如Pluronic F127 。
也可以用1/10 浓度的Calcein, AM溶液代替培养基。
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文献和实验Ren L, Liu J, Liu C, Yang T, Wu X, Zhang X, Yang L, Xia J, Li W. AIn Vitro Cell(RAW264.7 cells;100 ng/mL LPS,24 h at 37 °C) RAW264.7 cells were seeded in confocal dishes at a density of 1 × 105 cells per dish. After the culture of 24 h, cells were treated with 100 ng/mL LPS in different media, including a control medium, PACDFe extract, and PACDFe hydrogel extract supplemented with 1 μM LL-37 for another 24 h at 1835 °C. 更多文献信息请详询客服
染色液,10~30 min后在荧光显微镜下或者激光共聚焦下观察。线粒体状态好时细胞以绿色为主,当红光信号增强时,红绿相叠,以橙色为主。该染色运用于悬浮细胞时还可以通过流式细胞仪进行检测,收集红/绿信号强度,计算其强度比。 钙黄绿素-AM(Calcein-AM):Calcein-AM本身并不是荧光分子,但通过活细胞内的酯酶作用,Calcein-AM能脱去AM基,产生的Calcein能发出强绿色荧光(激发:490 nm,发射:515 nm)。因此Calcein-AM仅对活细胞染










