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核糖核酸酶H 9050-76-4

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  • ¥320
  • 康瑞纳
  • 进口/国产
  • B2019
  • 2026年03月09日
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    • 保存条件

      RT/2-8℃/-20℃

    • 保质期

      3年

    • 英文名

      Ribonulease H

    • 库存

      999

    • 供应商

      北京康瑞纳生物科技有限公司

    • CAS号

      9050-76-4

    • 规格

      100u

    核糖核酸酶H 9050-76-4 核糖核酸酶H 9050-76-4
    产品名称:核糖核酸酶H 9050-76-4
    产品编号:B2019
    中文别称 核糖核酸酶H; RNA酶H
    英文别称 Ribonuclease H;RNase H
    储存条件 -20℃
    规格 100u

    产品介绍:
    核糖核酸酶 H(RNase H)是降解 RNA/DNA 杂合分子的 RNA 链的内切核
    糖核酸酶。RNase H 消化产生具有 5′-磷酸和 3′-羟基末端的核糖核苷酸分子。
    RNase H 对单链或双链 RNA 分子几乎无活性。
    5×RNase H Buffer:500 mM Tris-HCl;750 mM KCl;30mM MgCl2;100
    mM DTT;pH 8.3,25°C。
    酶存储液:20 mM Tris-HCl;100mM KCl;10 mM MgCl 2;0.1 mM
    EDTA;0.1 mM DTT;50%甘油;pH 7.9,25°C。
    活性定义:1 单位指 50 μl 反应体系中,37°C 条件下,20分钟水解 1 nmol
    [3H] 标记 poly(rA) 与 poly(dT) 杂交双链中的 RNA 形成酸可溶性核糖核苷酸所
    需要的酶量。
    来源:重组 E. coli 菌株,携带有从 E. coli 中克隆的 RNase H(rnh)基因。
    失活:65°C 20 分钟
    产品应用:
    1. 除去杂交到 poly(dT) 上的 mRNA poly(A);
    2. 在 cDNA 第二链合成时除去 mRNA。
    反应条件:
    37℃温浴
    质量控制 :
    1. 单位特性分析:使用 2 倍连续稀释法测量比活性。在 1×RNAse H 反应
    缓冲液中制备酶的稀释液,并加入到含有 3 H 标记的 poly(rA),poly(dT)
    DNA 和 1×RNAse H 缓冲液的 50μL 反应中。将反应在 37°C 下温育 20 分钟,倒
    在冰上,并分析 TCA 可溶性计数的释放。
    2. 蛋白浓度(OD280)测量:通过 OD280 吸光度测定。
    3. SDS-PAGE(物理纯度评估):通过浓缩和稀释的酶溶液的 SDS- PAGE,随后通过银染检测来评估物理纯度。该测试的验收标准要求浓缩样品中污染物条带的总质量不超过稀释样品中目标蛋白质条带的质量,证实浓缩样品
    的纯度大于 99%。
    污染测试:
    1. 单链核酸外切酶活性:在含有放射性标记的单链 DNA 底物和 10 μl 酶
    溶液的 50 μl 反应物中,37°C 下孵育 4小时。结果显示 TCA 可溶性计数的释放
    小于 5.0%。
    2. 双链核酸外切酶活性:在含有放射性标记的双链 DNA 底物和 10 μl 酶
    溶液的 50μl 反应物中,37°C 下孵育 4小时。结果表明,TCA 可溶性计数的释放
    小于 1.0%。
    3. 双链内切核酸酶活性:在含有 0.5 μg pBR322 DNA 和 10μl 酶溶液的
    50μl 反应中,37°C 温育 4 小时,通过琼脂糖凝胶电泳测定,结果显示没有肉眼
    可见转化为带切口的环状 DNA 。
    4. 大肠杆菌 16S rDNA 污染检测:将重复的 5μl 酶溶液样品变性并使用对
    应于 16S rRNA 基因座的寡核苷酸引物在 TaqMan qPCR 测定中筛选污染性大肠
    杆菌基因组 DNA 的存在。 测试的接受标准是由 3 个重复的无模板对照样品的
    平均值产生的阈值循环计数(Ct)。 基于无模板对照 Ct 值和标准曲线数据之
    间的相关性,该测定的检测限为<10 拷贝基因组/样品。
    5. 非特异性 RNase 测定:使用 RNase Alert 试剂盒(Integrated DNA
    Technologies)根据制造商的指南筛选产物的非特异性 RNase 污染,未检测到非
    特异性核糖核酸酶活性。
    保存条件:-15°C 到 -25°C 保存

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    该产品被引用文献
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