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- 文献和实验
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- 保存条件:
RT/2-8℃/-20℃
- 保质期:
3年
- 英文名:
D-Luciferin, free acid
- 库存:
999
- 供应商:
北京康瑞纳生物科技有限公司
- CAS号:
2591-17-5
- 规格:
10mg
D-虫荧光素游离酸 2591-17-5 D-虫荧光素游离酸 2591-17-5
产品名称:D-虫荧光素游离酸 2591-17-5
产品编号:B2627
中文别称 D-虫荧光素游离酸
英文别称 D-Luciferin, free acid
CAS 2591-17-5
分子式 C11H8N2O3S2
分子量 280.32
储存条件 -20°C干燥避光保存 , 保质期 1年
纯度 ≥99% (HPLC)
性状 白色粉末
包装 瓶
规格 25mg 100mg 1g
产品描述:
D-虫荧光素(D-Luciferin)是萤火虫荧光素酶底物,其量子效率为0.88,是Luminol的20倍。反应原理:首先,在镁离子存在下荧光素酶使荧光素与ATP反应,接着它被氧化形成二氧杂环丁烷结构并发出黄绿色的光。Luciferin-luciferase发光用于ATP监控以测定细胞活力以及细菌计数。它还用于报告基因检测。可与小动物活体成像系统配套使用,用于标记LUC基因后的体内活体荧光检测。
应用:
(1) 体外分析
(2) 活体成像分析
(3) 高灵敏度ATP分析
使用方法:
1. 活体成像分析方法
(1) 用DPBS(w/o Mg2+ 、Ca2+ )配置D-Luciferin工作液(15mg/mL)* ,0.2 μm滤膜无菌过滤。
(2) 注射量:10μL/g的体重,如10g 重小鼠,注射100μL 工作液(1.5 mg D-Luciferin)。
(3) 腹腔注射10~15分钟后,上机进行图像分析。
2. 体外分析方法
(1) 用无菌水配置200× 的D-Luciferin储备液(30mg/mL)*,立即使用,或-20℃保存。
(2) 用预热好的完全培养基1∶200稀释D-Luciferin储备液,配置工作液(150μg/mL)。
(3) 去除培养细胞的培养基。
(4) 进行图像分析前,向细胞中添加1× 的D-Luciferin工作液,进行图像分析**。
(5):溶解D-Luciferin时要完全。
(6):在图像分析前,将细胞进行37℃的短时间培养可以增加信号强度。
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D-虫荧光素游离酸(D-Luciferin, free acid)、D-虫荧光素钾盐(D-Luciferin, potassium salt)和D-虫荧光素钠盐(D-Luciferin, sodium salt),钾盐、钠盐的形式是最通用的,因为它们都易溶于水。钾盐也是活体动物检测使用的主要形式。它们的激发和发射波长分别为328nm和533nm。
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文献和实验Ren L, Liu J, Liu C, Yang T, Wu X, Zhang X, Yang L, Xia J, Li W. AIn Vitro Cell(RAW264.7 cells;100 ng/mL LPS,24 h at 37 °C) RAW264.7 cells were seeded in confocal dishes at a density of 1 × 105 cells per dish. After the culture of 24 h, cells were treated with 100 ng/mL LPS in different media, including a control medium, PACDFe extract, and PACDFe hydrogel extract supplemented with 1 μM LL-37 for another 24 h at 1828 °C. 更多文献信息请详询客服
荧光素酶的发光是酶促反应产生的自发光,不需要激发光,但需要底物荧光素。不同的荧光素酶所需的底物不同。例如,萤火虫荧光素酶的底物是 D-荧光素,海肾荧光素酶的底物是腔肠素。其中,D-荧光素的使用频率最多,荧光素在氧气、ATP 存在的条件下和荧光素酶发生反应,生成氧化荧光素,并产生发光现象。 目前市场上 D-荧光素主要有三种形式,D-荧光素(游离酸)、D-荧光素(钠盐)和 D-荧光素(钾盐)。这三种形式主要区别在于溶解特性,配成溶液后,其在绝大多数应用上都没有实质性的差别,整体来看,钾盐在活体
和其它甲虫荧光素酶是分子量相对较大的酶,分子量大小约为 60kDa,底物为 D-荧光素,需要辅助因子 ATP 和 Mg2+。FLuc 发出的是黄红光,发射光峰值为 560nm。 海肾荧光素酶(RLuc)是一种从 Renilla reniformis 分离的分子量大小为 36 kDa 的荧光素酶。与 FLuc 相比,海肾荧光素酶的底物和辅助因子需求不同。RLuc 在氧气存在下催化腔肠素,产生 480 nm 的蓝光。海肾萤光素酶因其与 FLuc 在底物要求和光输出方面的差异而可用于双重报告检测。 近年
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