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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2℃-8℃
- 保质期:
24个月
- 英文名:
TBST Washing Buffered Solution for Western Blots, pH7.5, 1X
- 库存:
1000
- 供应商:
赛尔沃德生命科学部
- 规格:
500ml
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文献和实验5) 500ml ddH2O 洗涤一次,700g, 5 分钟,RT,收集菌体。 6) 30ml 1X TE/LiAC 洗涤菌体(预先配制50ml 1X TE/LiAC), 转入100ml 离心管。 7) 700g, 5 分钟, RT。(预先配制50ml 1XTE/LiAC/PEG)。 8) 加入12ml 1X TE/LiAc 重悬菌体。 9) 加入100~500μg 文库DNA, 2000μl 预变性的Carrier DNA,轻轻混匀。 10)加入50 ml 1XTE/LiAc/PEG
人 iPS 细胞体外分化为气道上皮肺类器官用于呼吸系统疾病研究应用以及iPSC操作指南
的PluriSTEM®(SCM130)、Accutase(A6964)和DMEM/F12(D6421),以传代细胞。将试剂温热至室温。 2. 在细胞传代前一小时,将ROCK抑制剂(ROCKi)Y-27632(SCM075)加入到6孔板的每个孔中,终浓度为10 μM。 3. 1小时后,用解剖显微镜目视检查含有要传代的人多能细胞的平板。去除自发分化的区域。 4. 从孔的刮擦区域吸出含有细胞的培养基。用2 mL DMEM/F-12(D6421)培养基或1X PBS(D8537)冲洗每个孔。 5. 吸干净6孔板的每个孔
瓶4-5次使胰蛋白酶侵入细胞。孵育1分钟后,吸取胰蛋白酶吹打细胞瓶,使连接松散的细胞脱落和团块分解。 5.加入新鲜的,完整的介质使胰蛋白酶失活。一定要在胰酶失活前单细胞。 mESCs: 1.加入2 mM胸苷培养16个小时,使得干细胞达到25-30%汇合。 2.加入1X PBS洗涤除去胸苷,加入新鲜的KO-DMEM完全培养液培养4个小时,释放细胞。细胞达到G2期有丝分裂阶段。 hypotonization 基于 criteria
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