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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
43
- 英文名:
Recombinant Chemokine C-X-C-Motif Ligand 16 (CXCL16)
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20度
- 规格:
10µg50µg 200µg 1mg 5mg
IPTG浓度
有可能,宿主中的蛋白表达将通过lac操纵子系统操作。这个系统的详细解释可以在别处找到,你加入异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),一种乳糖类似物,控制蛋白的表达。蛋白的表达应处于生长的对数期,即当溶液的波长600(OD 600)处的光密度达到0.4-0.6。 如果你的目标是可溶性蛋白质,最好不要改变细胞中蛋白的折叠功能。已经假定不溶性蛋白可能是由于分子伴侣的存在。因此,使用高浓度的IPTG(> 1mM)可能不总是产生的结果。尝试几个不同的浓度,看看哪一个给你最高的可溶性蛋白的产量。
温度
偶尔,你可以在37°C的典型温度下,通过生长和诱导分离可溶性形式的蛋白质,但通常情况下,溶解度在较低温度下增强。可尝试在30°C,25°C和18°C下进行诱导。 注意:如果首先在37℃生长,先让培养物冷却到诱导温度,再加入IPTG。
诱导时间
更长并不总是更好。对于对宿主有毒的蛋白尤其如此。在诱导期间,每隔几个小时取样,并检查目的蛋白的表达。典型的诱导时间根据温度而变化:对于37℃,尝试4小时;对于30℃,进行5-6小时,并且任何低于25℃的温度应该允许生长过夜。
| 产品名称 | 人趋化因子C-X-C-基元配体16(CXCL16)重组蛋白 |
| 货号 | LZ-D6835 |
| 规格 | 10µg50µg 200µg 1mg 5mg |
| 物种 | Homo sapiens (Human,人) |
英文别名:SR-PSOX; CXCLG16; SRPSOX; Scavenger receptor for phosphatidylserine and oxidized low density lipoprotein; Small-inducible cytokine B16
物种:Homo sapiens (Human,人)
来源:原核表达
宿主:E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位:Cell membrane; Secreted. Single-pass type I membrane prote
预测分子量:19.2kDa
实际分子量:-(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Ser33~Thr171 (Accession # Q9H2A7) with
缓冲液成份:磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性状:冻干粉
纯度:> 95%
等电点:9.0
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10µg50µg 200µg 1mg 5mg
重组蛋白表达体系分析:
(一)原核表达系统
原核表达系统有大肠杆菌表达系统、芽孢杆菌表达系统、链霉菌表达系统。其中最常用的表达系统主要是大肠杆菌表达系统。卡梅德生物通过每年多达400个原核蛋白制备项目的技术积累拥有一套完整的蛋白表达和纯化方案,为客户提供优质服务。
(二)酵母表达系统
酵母是一种真核微生物,其细胞有表达外源蛋白的能力,可以达到一个相当高的胞密度状态,在酵母中表达外源蛋白可以进行翻译后修饰,如磷酸化和糖基化。由于酵母宿主细胞结合了细菌和高阶生物宿主细胞表达系统的优良特性,当外源蛋白未能成功地在大肠杆菌中表达时,它是一个不错的选择。用于外源蛋白表达的酵母菌株包括酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、毕赤酵母和乳酸克鲁维酵母。卡梅德生物拥有丰富的酵母蛋白重组表达、发酵和纯化经验,能够快速为不同客户定制酵母表达策略。
(三)昆虫细胞表达系统
膜蛋白、大分子质量蛋白和蛋白激酶这些很难用细菌表达系统表达的蛋白,在Sf9或High-5等昆虫细胞中实现了表达。在大多数昆虫细胞表达系统中,外源基因通过杆状病毒载体转染宿主细胞,含有目标基因的标记盒通过同源重组并入宿主基因组中。卡梅德生物可以提供纯度高达95%的全长膜蛋白定制产品,免费对客户提供的基因进行序列分析,据Sf9,Sf21,Hi-5及S2昆虫细胞的密码子偏爱性,免费为您进行密码子优化,从而有效提高重组蛋白表达量。
(四)哺乳动物细胞表达系统
当含有复杂二硫键或翻译后修饰的靶蛋白不能使用其他表达系统表达时,哺乳动物细胞可表达外源蛋白。常用的外源蛋白表达的哺乳动物细胞系包括海拉(Hela)细胞、人胚肾细胞(HEK293)和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)。卡梅德生物建立了完善的哺乳表达体系,包括但不限于FreeStyle 293-F cell line和Expi CHO-S等细胞系,配合卡梅德设计的高表达载体(含有全长的CMV启动子以及优化后的分泌信号肽序列),能够为客户提供更高表达水平的重组蛋白哺乳动物细胞表达与制备。
| Humanproteindisulfideisomerase,PDIELISAKit人蛋白质二硫键异构酶(PDI)ELISA试剂盒规格:96T/48T | CES5A重组小鼠 CES5 / Carboxylesterase-5 蛋白 (His 标签) Protein |
| 大鼠金属硫蛋白(MT)ELISA试剂盒 ,英文名: MT ELISA Kit | CLEC3B Protein Human 重组人 CLEC3B / Tetranectin 蛋白 (His 标签) |
| 人细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA检测试剂盒Humaniercellularadhesionmolecule1,ICAM-1ELISAKit 96T/48T | ENTPD5重组人 ENTPD5 蛋白 (His 标签) Protein |
| 猪乙型脑炎病毒(JEV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T | THBD Protein Rat 重组大鼠 Thrombomodulin / THBD 蛋白 (His 标签) |
| CLIAKitforNF-KapBp65(Rabbitnuclearfactor-KapBp65)ELISAKit兔核因子κB亚基p65亲和肽规格:48T/96T | Bax peptide Bax(多肽抗原 0.5mgBax peptide Bax(多肽抗原) |
| Rat thrombus precursor protein (TpP) ELISA Kit 大鼠血栓前体蛋白(TpP)ELISA试剂盒 | FCER2 Protein Human 重组人 CD23 / FCER2 蛋白 (His 标签) |
| Humanai-glycoproteinaibody,GPELISAKit 人抗糖蛋白抗体(GP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 | H1F0重组人 H1F0 / Histone H1 蛋白 (His 标签) Protein |
| humandihydropyrimidinase-like3,DPYSL3ELISA试剂盒人二氢嘧啶酶样3(DPYSL3)ELISA试剂盒规格:96T/48T | HA Protein H1N1 重组甲型流感 H1N1 (A/Ohio/UR06-0091/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签) |
| 组织MUSK激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次 | IFNA13重组小鼠 IFNA13 / Interferon alpha-13 蛋白 (His 标签) Protein |
| Humanphospholamban,PLNELISAKit人受0蛋白(PLN)ELISA试剂盒规格:96T/48T | HA Protein H9N2 重组甲型流感 H9N2 (A/HongKong/1073/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签) |
| 人17β-雌二醇(17β-Esadiol)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 | PCSK9重组人 PCSK9 / NARC1 蛋白 (His 标签) Protein |
| 山羊瘦素(LEP)免疫试剂盒 Goat Leptin,LEP ELISA kit | 维受体α(RARα)重组蛋白 Recombinant Retinoic Acid Receptor Alpha (RARa) |
| rabbitTestoterone,TELISA试剂盒兔子睾同(T)ELISA试剂盒规格:96T/48T | VEGFA Protein Human 重组人 VEGF121 / VEGF-A 蛋白 |
| 尿蛋白(UP)ELISA试剂盒 ,英文名: UP ELISA Kit | 人趋化因子C-X-C-基元配体16(CXCL16)重组蛋白肌球蛋白轻链1(MYL1)重组蛋白 Recombinant Myosin Light Chain 1, Alkali, Fast Skeletal (MYL1) |
| HumanBeta-HydroxybyricAcid,β-OHBELISA试剂盒人β(β-OHB)ELISA试剂盒规格:96T/48T | CD47重组人 CD47 蛋白 (Fc 标签) Protein |
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文献和实验因为短的肽标签对目标蛋白的结构影响最小,而大的亲和标签可能限制重组蛋白的折叠,影响蛋白质的生物学功能。(2)亲和标签对蛋白质稳定性的影响,亲和标签的加入是否会影响到目标蛋白的正确折叠,是促进目标蛋白的可溶性,还是容易形成包涵体,会不会造成氨基酸C和N端破坏,使目的蛋白表达不完全。(3)亲和标签所融合的位置,亲和标签可以加在N端,可以加在C端,也进行串联。多数情况下蛋白质的N端区域对蛋白质的功能不是太重要,所以在N端进行融合标签的融合常常能保留蛋白质的生物学功能。由于N端DNA序列对蛋白质的转录
Strep-tag®技术是亲和纯化重组蛋白的常用工具,它基于自然界中最强的非共价相互作用之一,即生物素与链霉亲和素的相互作用。该纯化系统的突出特点是纯化过程温和、目的蛋白纯度高、特异性强、兼容多种表达系统,对于有挑战性蛋白的纯化十分有帮助,因此近些年来脱颖而出。 本文将从以下方面介绍Strep-tag®技术: 标签介绍 纯化原理 标签-配体 纯化步骤 系统特点 标签介绍 目前有2种广泛使用的Strep标签: 它们分别是: Strep-tag®II 8 aa小标签(Trp-Ser
X-100或脱氧胆酸钠)和低浓度变性剂(2mol/L尿素或盐酸胍等)洗涤除去脂类和膜蛋白,这一步很重要,否则会导致包涵体溶解和复性的过程中重组蛋白质的降解[6、7、8]。 包涵体的溶解必须用很强的变性剂,如8mol/L尿素、6~8mol/L盐酸胍,通过离子间的相互作用破坏包涵体蛋白间的氢键而增溶蛋白。其中尿素的增溶效果稍差,异氰盐酸胍最强;去污剂,如SDS[7],可以破坏蛋白内的疏水键,可以增溶几乎所有的蛋白,但由于无法彻底去除而不允许用在制药行业中;酸,如70%甲酸[9],可以破坏
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