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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
26
- 英文名:
Active Fibroblast Growth Factor 2, Basic (FGF2)
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20度
- 规格:
大鼠粒细胞集落刺激因子(GCSF)真核蛋白
| 产品名称 | 牛碱性成纤维细胞生长因子(FGF2)活性蛋白 |
| 货号 | LZ-D7636 |
| 规格 | 10µg50µg 200µg 1mg 5mg |
| 物种 | Bos taurus; Bovine (Cattle,牛) 。 |
英文别名:B-FGF; BFGF; FGFB; HBGH-2; Basic Fibroblast Growth Factor; Heparin-binding growth factor 2
物种:Bos taurus; Bovine (Cattle,牛) 。
缓冲液成份:20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性状:冻干粉
纯度:> 97%
等电点:9.6
应用:Cell culture; Activity Assays
规格:10µg50µg 200µg 1mg 5mg
重组蛋白表达体系分析:
(一)原核表达系统
原核表达系统有大肠杆菌表达系统、芽孢杆菌表达系统、链霉菌表达系统。其中最常用的表达系统主要是大肠杆菌表达系统。卡梅德生物通过每年多达400个原核蛋白制备项目的技术积累拥有一套完整的蛋白表达和纯化方案,为客户提供优质服务。
(二)酵母表达系统
酵母是一种真核微生物,其细胞有表达外源蛋白的能力,可以达到一个相当高的胞密度状态,在酵母中表达外源蛋白可以进行翻译后修饰,如磷酸化和糖基化。由于酵母宿主细胞结合了细菌和高阶生物宿主细胞表达系统的优良特性,当外源蛋白未能成功地在大肠杆菌中表达时,它是一个不错的选择。用于外源蛋白表达的酵母菌株包括酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、毕赤酵母和乳酸克鲁维酵母。卡梅德生物拥有丰富的酵母蛋白重组表达、发酵和纯化经验,能够快速为不同客户定制酵母表达策略。
(三)昆虫细胞表达系统
膜蛋白、大分子质量蛋白和蛋白激酶这些很难用细菌表达系统表达的蛋白,在Sf9或High-5等昆虫细胞中实现了表达。在大多数昆虫细胞表达系统中,外源基因通过杆状病毒载体转染宿主细胞,含有目标基因的标记盒通过同源重组并入宿主基因组中。卡梅德生物可以提供纯度高达95%的全长膜蛋白定制产品,免费对客户提供的基因进行序列分析,据Sf9,Sf21,Hi-5及S2昆虫细胞的密码子偏爱性,免费为您进行密码子优化,从而有效提高重组蛋白表达量。
(四)哺乳动物细胞表达系统
当含有复杂二硫键或翻译后修饰的靶蛋白不能使用其他表达系统表达时,哺乳动物细胞可表达外源蛋白。常用的外源蛋白表达的哺乳动物细胞系包括海拉(Hela)细胞、人胚肾细胞(HEK293)和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)。卡梅德生物建立了完善的哺乳表达体系,包括但不限于FreeStyle 293-F cell line和Expi CHO-S等细胞系,配合卡梅德设计的高表达载体(含有全长的CMV启动子以及优化后的分泌信号肽序列),能够为客户提供更高表达水平的重组蛋白哺乳动物细胞表达与制备。
| Bruton酪氨酸激酶抑制剂蛋白抗体 Anti-IBTK WB IHC-P IHC-F IF | TEK重组人 Tie2 / CD202b 蛋白 (His & Fc 标签) Protein |
| 真核翻译起始因子3亚基L蛋白抗体 Anti-IF3EI WB IHC-P IHC-F IF | 线粒体外膜转位酶70A(TOMM70A)重组蛋白 Recombinant Translocase Of Outer Mitochondrial Membrane 70A (TOMM70A) |
| 干扰素诱导的三角形四肽重复蛋白2抗体 Anti-IFIT2 WB IHC-P IHC-F IF | NTM重组人 NTM / Neurotrimin 蛋白 (Fc 标签) Protein |
| 干扰素诱导的三角形四肽重复蛋白1B抗体 Anti-IFIT1B WB IHC-P IHC-F IF | CD200R1 Protein Human 重组人 CD200R1 蛋白 (His & Fc 标签) |
| 160kDa内含子结合蛋白抗体 Anti-IBP160 WB IHC-P IHC-F IF | HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/14/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签) |
| 磷酸化波形蛋白抗体 Anti-Phospho-Vimentin WB IHC-P IHC-F IF | CNDP1重组人 CNDP1 蛋白 (His 标签) Protein |
| 血管内皮生长因子C型抗体 Anti-VEGF-C WB IHC-P IHC-F IF | ACPL2 Protein Human 重组人 ACPL2 蛋白 (His 标签) |
| 囊泡相关膜蛋白3抗体 Anti-VAMP3 WB IHC-P IHC-F IF | RAB6A重组人 Rab6 / Rab GTPases / RAB6A 蛋白 (His 标签) Protein |
| 空泡分选蛋白18抗体 Anti-VPS18 WB IHC-P IHC-F IF | MERTK Protein Mouse 重组小鼠 MERTK / Mer 蛋白 (His & GST 标签) |
| 磷酸化波形蛋白抗体 Anti-Phospho-Vimentin WB IHC-P IHC-F IF | TNFSF12重组食蟹猴 / 人 TNFSF12 蛋白 (Fc 标签) Protein |
| 乳腺癌抑癌蛋白抗体 Anti-BCSC1 WB IHC-P IHC-F IF | AU1 tag peptide AU1 tag标签多肽 0.5mgAU1 tag peptide AU1 tag标签多肽 |
| 碱性核蛋白1/锌指蛋白basonuclin抗体 Anti-BNC1 WB IHC-P IHC-F IF | IL13RA2 Protein Rat 重组大鼠 IL13RA2 / IL13R 蛋白 (Fc 标签) |
| B淋巴细胞成熟因子抗体 Anti-BCMA WB IHC-P IHC-F IF | IL1R2 Protein Human 重组人 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白 (His 标签) |
| 乳腺癌膜蛋白11抗体 Anti-BCMP11 WB IHC-P IHC-F IF | 牛碱性成纤维细胞生长因子(FGF2)活性蛋白TPH1重组人 Tryptophan Hydroxylase 1 / TPH1 蛋白 (His 标签) Protein |
| 促凋亡Bik蛋白抗体 Anti-Bik WB IHC-P IHC-F IF | 嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)重组蛋白 Recombinant Eosinophil Chemotactic Factor () |
天然蛋白质关键参数有哪些?
IPTG浓度
有可能,宿主中的蛋白表达将通过lac操纵子系统操作。这个系统的详细解释可以在别处找到,你加入异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),一种乳糖类似物,控制蛋白的表达。蛋白的表达应处于生长的对数期,即当溶液的波长600(OD 600)处的光密度达到0.4-0.6。 如果你的目标是可溶性蛋白质,最好不要改变细胞中蛋白的折叠功能。已经假定不溶性蛋白可能是由于分子伴侣的存在。因此,使用高浓度的IPTG(> 1mM)可能不总是产生的结果。尝试几个不同的浓度,看看哪一个给你最高的可溶性蛋白的产量。
温度
偶尔,你可以在37°C的典型温度下,通过生长和诱导分离可溶性形式的蛋白质,但通常情况下,溶解度在较低温度下增强。可尝试在30°C,25°C和18°C下进行诱导。 注意:如果首先在37℃生长,先让培养物冷却到诱导温度,再加入IPTG。
诱导时间
更长并不总是更好。对于对宿主有毒的蛋白尤其如此。在诱导期间,每隔几个小时取样,并检查目的蛋白的表达。典型的诱导时间根据温度而变化:对于37℃,尝试4小时;对于30℃,进行5-6小时,并且任何低于25℃的温度应该允许生长过夜。
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文献和实验细胞因子简介 细胞因子(Cytokine,CK)是一类能在细胞间传递信息、具有免疫调节和效应功能的天然活性蛋白质,可以有效促进免疫细胞(如DC细胞,CIK细胞等)、干细胞的体外生长。根据细胞因子主要的功能可分为以下几类: 1,白细胞介素(Interleukin,IL)由淋巴细胞、单核细胞或其它非单个核细胞产生的细胞因子,在细胞间相互作用、免疫调节、造血以及炎症过程中起重要调节作用。 2,集落刺激因子(Colonystimulatingfactor,CSF)根据不同细胞因子刺激造血
5、胶质瘤专一性表达 目前已知鞘磷酸碱性蛋白基因上游(-1300~1)片段决定其在胶质瘤细胞中的专一性表达,Miyao等用该片段与HTK基因融合,转染胶质瘤细胞,在1μMganciclovir培养液中,90%胶质瘤细胞死亡,而对照组生长不受影响。 6、肺癌专一性表达 人表面活性蛋白A是大多数肺癌表达的物质。Smith 等用SPA-1上游(-2600~178)片段驱动HSV-TK基因,转化肺癌 细胞株 H441,给予ganciclovir
? 在4度放置半个月,都没什么问题 。在室温放置超过48小时,可能会对目的蛋白有影响,因为尿素在碱性条件下可使一些氨基酸酰基化,所以早些处理BI溶液比较好。 4. 包涵体复性有什么原则? 低浓度,平缓梯度,低温。 5. 复性时的蛋白浓度是? 一般使用浓度为0.1-1mg/ml,太高的浓度容易形成聚体沉淀,太低的浓度不经济,而且很多蛋白在低浓度时不稳定,很容易变性。 6. 复性中蛋白析出是怎么回事?该怎么处理? 出现蛋白析出,肯定是条件变化太剧烈了。复性应该采取复性液浓度
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