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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
肠道病毒70型染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
- 保质期:
6个月
- 供应商:
上海酶联生物科技有限公司
- 保存条件:
避光低温保存
- 规格:
50次
产品及特点:
1. 一站式,用于不需要单独准备每种成分,包括引物和对照。
2. 根据肠道病毒70型的保守基因序列设计的引物,具有良好的特异性。
3. 基于染料法 qRT-PCR 检测,灵敏度比常规 RT-PCR 高 10-100 倍,可以达到至少 1000 拷贝/反应。
4. 使用一管式 qRT-PCR 技术,RT 和 PCR 两步在一个试管内完成,不需要中间转移样品,降低了操作误差和可能的污染。
5. 本产品足够 50 次 30μL 体系的 RT-PCR。
6. 本产品由酶联生物提供,不得用于临床诊断。
规格及成分:
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | 2×qRT-PCR 缓冲液 | 500 μL(棕色管) |
| 试剂二 | 10×qRT-PCR 酶混合液 | 100 μL(红盖) |
| 试剂三 | ROX 染料 I,50× | 20 μL(棕色管) |
| 试剂四 | ROX 染料 II,50× | 20 μL(棕色管) |
| 试剂五 | 荧光 PCR 专用模板稀释液 | 1mL(黄盖) |
| 试剂六 | 肠道病毒70型染料法 qRT-PCR 引物混合液 | 100 μL(白盖) |
| 试剂七 | 肠道病毒70型染料法 qRT-PCR 阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL) | 50 μL(黄盖) |
| 试剂八 | 沙核酸释放剂(试用装) | 20 次(1mL,绿盖) |
| 试剂九 | 使用手册 | 1 份 |
低温运输、-20℃保存,有效期一年。
阳性对照需要因易污染其他成分需要单独放置。本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供 DNA 片段作为阳性对照。
自备试剂:
样品 RNA。
四、数据处理:
如果把本试剂盒用于定量检测,则以阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品的 Ct 值从标准曲线上推算出样品 DNA浓度的 log 值,再推算出其浓度。肠道病毒70型染料法荧光定量RT-PCR试剂盒现货供应用于定性检测,只判断阳性或阴性,则阴性对照 Ct 必须大于或等于 40。阳性对照必须有荧光对数增长,有典型扩增曲线,Ct 值应该小于或等于 30。对待测样品,如果其 Ct 大于或等于 40 则为阴性,如果小于或等于 35 则为阳性。如果在 35-40 之间,则重复一次。重复实验的 Ct 值如果大于或等于 40 则为阴性,如果小于 40,则为阳性。
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文献和实验怎么整板都没有扩增曲线,是哪一步实验出问题了吗? 这个病原体这段时间怎么经常检出?不会是有污染了吧? 在您看到荧光定量 PCR 结果的时候是否也有过这样的疑问?隐隐约约感觉实验某个步骤出现问题,却又不知该从何下手。别担心,有「对照精灵」们来助您一臂之力。 荧光定量 PCR 实验,从样本采集到结果分析包含多个实验步骤,针对不同的步骤,可以选择不同的对照对流程进行监控(图 1)。 图 1. 实验流程和常见阴阳性对照种类。 阴性对照 荧光定量 PCR 的灵敏度可以达到 1 拷贝/孔,如此高灵敏
分钟内快速纯化高品质DNA或者RNA ♦ 无需酚/氯仿抽提,无需乙醇沉淀 ♦ 重复性强,产量高,洗脱体积50-200 µl ♦ 纯化灵敏度高,含有carrier RNA组份,>80%回收率 ♦ 完全去除污染物和抑制剂,适用于各种下游应用\ 左图为肠道病毒EV71型提取核酸RNA后进行荧光定量PCR的检测结果,样本为肠道病毒EV71型灭活病毒培养液,病毒含量分别为5×106copies/ml、5×105copies/ml、5×104copies/ml
,其中规定了确诊病例的诊断方法:具有急性发烧呼吸道疾病的临床症状并且经实时荧光定量PCR (real-time RT-PCR)或病毒分离培养 (viral culture)实验室检测方法检验证实感染A(H1N1)型猪流感病毒。卫生部办公厅于4月30日印发了《人感染猪流感预防控制技术指南(试行)》的通知》[7],其中在实验室检测和病例诊断报告章节,内容如下:检测程序呼吸道标本应首先应用real time RT-PCR方法检测A型流感病毒的M基因、Swine( H1N1)的HA基因和NP基因,以及质控对照
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