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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
31
- 英文名:
Recombinant Interleukin 1 Beta (IL1b)
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20度
- 规格:
10µg50µg 200µg 1mg 5mg
| 产品名称 | 斑马鱼白介素1β(IL1b)重组蛋白 |
| 货号 | LZ-D7203 |
| 规格 | 10µg50µg 200µg 1mg 5mg |
| 物种 | Danio rerio (Zebrafish,斑马鱼) |
英文别名:IL1-B; IL1-Beta; IL1F2; IL-1β; Interleukin-1 Family Member 2; Catabolin
物种:Danio rerio (Zebrafish,斑马鱼)
来源:原核表达
宿主:E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位:分泌
预测分子量:34.1kDa
实际分子量:37kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Met1~Ile273 with N-terminal His Tag
缓冲液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.
性状:冻干粉
纯度:> 90%
等电点:5.4
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10µg50µg 200µg 1mg 5mg
重组蛋白表达体系分析:
(一)原核表达系统
原核表达系统有大肠杆菌表达系统、芽孢杆菌表达系统、链霉菌表达系统。其中最常用的表达系统主要是大肠杆菌表达系统。卡梅德生物通过每年多达400个原核蛋白制备项目的技术积累拥有一套完整的蛋白表达和纯化方案,为客户提供优质服务。
(二)酵母表达系统
酵母是一种真核微生物,其细胞有表达外源蛋白的能力,可以达到一个相当高的胞密度状态,在酵母中表达外源蛋白可以进行翻译后修饰,如磷酸化和糖基化。由于酵母宿主细胞结合了细菌和高阶生物宿主细胞表达系统的优良特性,当外源蛋白未能成功地在大肠杆菌中表达时,它是一个不错的选择。用于外源蛋白表达的酵母菌株包括酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、毕赤酵母和乳酸克鲁维酵母。卡梅德生物拥有丰富的酵母蛋白重组表达、发酵和纯化经验,能够快速为不同客户定制酵母表达策略。
(三)昆虫细胞表达系统
膜蛋白、大分子质量蛋白和蛋白激酶这些很难用细菌表达系统表达的蛋白,在Sf9或High-5等昆虫细胞中实现了表达。在大多数昆虫细胞表达系统中,外源基因通过杆状病毒载体转染宿主细胞,含有目标基因的标记盒通过同源重组并入宿主基因组中。卡梅德生物可以提供纯度高达95%的全长膜蛋白定制产品,免费对客户提供的基因进行序列分析,据Sf9,Sf21,Hi-5及S2昆虫细胞的密码子偏爱性,免费为您进行密码子优化,从而有效提高重组蛋白表达量。
(四)哺乳动物细胞表达系统
当含有复杂二硫键或翻译后修饰的靶蛋白不能使用其他表达系统表达时,哺乳动物细胞可表达外源蛋白。常用的外源蛋白表达的哺乳动物细胞系包括海拉(Hela)细胞、人胚肾细胞(HEK293)和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)。卡梅德生物建立了完善的哺乳表达体系,包括但不限于FreeStyle 293-F cell line和Expi CHO-S等细胞系,配合卡梅德设计的高表达载体(含有全长的CMV启动子以及优化后的分泌信号肽序列),能够为客户提供更高表达水平的重组蛋白哺乳动物细胞表达与制备。
| CLIAKitforMDA(Mousemalondialchehyche)ELISAKit小鼠二规格:48T/96T | GAL重组人 Galanin / GAL 蛋白 (Fc 标签) Protein |
| 体液羟赖氨酸(HYL)含量比色法定量检测试剂盒20次 | HA Protein H3N2 重组甲型流感 H3N2 (A/Fujian/411/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签) |
| ELISAKitCholicacid牛胆酸规格:48T/96T | 角蛋白20(KRT20)重组蛋白 Recombinant Keratin 20 (KRT20) |
| 大鼠肝细胞生长因子激活物(HGFA)ELISA试剂盒 ,英文名: HGFA ELISA Kit | BACE1重组人 BACE1 / ASP2 蛋白 Protein |
| Porcine leukemia inhibitory factor receptor (LIFR) ELISA Kit 猪白血病抑制因子受体(LIFR)ELISA试剂盒 | B2M Protein Human 重组人 B2M / Beta-2-microglobulin 蛋白 (His 标签) |
| HumanMaixmetalloproteinase10,MMP-10ELISA试剂盒人基质金属蛋白酶10(MMP-10)ELISA试剂盒规格:96T/48T | TNFSF8 Protein Human 重组人 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (Fc 标签) |
| 组织样品组织蛋白酶E(CATHEPSINE)活性比色法定量检测试剂盒20次 | Penicillin G/OVA 青霉素G偶联鸡卵白蛋白 2mgPenicillin G/OVA 青霉素G偶联鸡卵白蛋白 |
| HumanHeatShockProtein20,HSP-20ELISAKit人热休克蛋白20(HSP-20)ELISA试剂盒规格:96T/48T | HA重组甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/4664T/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签) Protein |
| 人雄激素受体(AR)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 | CIRBP Protein Human 重组人 CIRBP / Cold-inducible RNA-binding 蛋白 (His 标签) |
| 猪前列腺素G/H合酶2(PTGS2)免疫试剂盒 Pig prostaglandin G/H syhase 2,PTGS2 ELISA kit | PEPT2 (Peptide-transporters 2 0.5mgPEPT2 (Peptide-transporters 2) 肠道肽转运蛋白2/小肽转运蛋白2抗原 |
| MouseBonemorphogeneticproteieceptorⅡ,BMPR-ⅡELISAKit 小鼠骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 | HAVCR2重组人 TIM-3 / HAVCR2 蛋白 (His 标签) Protein |
| CLIAKitforHumanInsulieceptorBeta,ISR-BetaELISAKIT人胰岛素受体β规格:48T/96T | ECD Protein Human 重组人 ECD / Ecdysoneless homolog 蛋白 (His & GST 标签) |
| ELISAKitMIP-3β大鼠巨噬细胞炎性蛋白3β规格:48T/96T | STIM1重组人 STIM1 / GOK 蛋白 (His 标签) Protein |
| 微型RNA(miRNA)扩增试剂盒20次 | 斑马鱼白介素1β(IL1b)重组蛋白HA重组甲型流感 H2N2 (A/Japan/305/1957) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签) Protein |
| 大鼠肿瘤转移抑制基因KISS1蛋白(KISS1/Kisspeptin 1)ELISA试剂盒 ,英文名: KISS1/Kisspeptin 1 ELISA Kit | CD40 Protein Human 重组人 CD40 / TNFRSF5 蛋白 (His & Fc 标签) |
天然蛋白质关键参数有哪些?
IPTG浓度
有可能,宿主中的蛋白表达将通过lac操纵子系统操作。这个系统的详细解释可以在别处找到,你加入异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),一种乳糖类似物,控制蛋白的表达。蛋白的表达应处于生长的对数期,即当溶液的波长600(OD 600)处的光密度达到0.4-0.6。 如果你的目标是可溶性蛋白质,最好不要改变细胞中蛋白的折叠功能。已经假定不溶性蛋白可能是由于分子伴侣的存在。因此,使用高浓度的IPTG(> 1mM)可能不总是产生的结果。尝试几个不同的浓度,看看哪一个给你最高的可溶性蛋白的产量。
温度
偶尔,你可以在37°C的典型温度下,通过生长和诱导分离可溶性形式的蛋白质,但通常情况下,溶解度在较低温度下增强。可尝试在30°C,25°C和18°C下进行诱导。 注意:如果首先在37℃生长,先让培养物冷却到诱导温度,再加入IPTG。
诱导时间
更长并不总是更好。对于对宿主有毒的蛋白尤其如此。在诱导期间,每隔几个小时取样,并检查目的蛋白的表达。典型的诱导时间根据温度而变化:对于37℃,尝试4小时;对于30℃,进行5-6小时,并且任何低于25℃的温度应该允许生长过夜。
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文献和实验的生长, 而RNAi可以利用同一基因家族的多个基因具有一段同源性很高的保守序列这一特性, 设计针对这一区段序列的dsRNA分子,只注射一种dsRNA即可以产生多个基因同时剔除的表现,也可以同时注射多种dsRNA而将多个序列不相关的基因同时剔除。 尽管目前RNAi技术在哺乳动物中的应用还处于探索阶段,但它在斑马鱼和老鼠等脊椎动物中的成功应用预示着RNAi将成为基因治疗中重要的组成部分,人工合成的dsRNA寡聚药物的开发将可能成为极具发展前途的新兴产业。
Palindromic Repeats)/Cas( CRISPR-associated) 系统是一种广泛存在于细菌与古细菌中,由RNA介导的可遗传获得性免疫系统。它能够为宿主细胞提供对外源DNA(如噬菌体质粒)的免疫功能。在此基础上建立起来的CRISPR/Cas9 基因敲除系统目前广泛应用于原核生物、酿酒酵母、线虫、斑马鱼及哺乳动物中。 工作原理 crRNA(CRISPR-derived RNA)通过碱基配对与tracrRNA(trans-activating RNA)结合形成
的核酸或蛋白质类药物,已经应用于临床。同时,许多生物工程新药正准备推向市场,应用于临床,前景十分广阔。自80年代以来,仅日、美两国开发的生物技术新药就达224种,其中日本117种,美国107种。而且,大部分药品是重组DNA药物或重组蛋白质药物。从市场份额来看,在美国,到2003年将有15%药品为生物技术产品。生物技术药物分为两大类:一是用于疾病治疗的药物,另一类是用于疾病的预防。 生物技术在传统药材生产中也将起到重要作用。用于药材生产的植物细胞经过基因重组、接种、诱导、筛选高产优质的细胞
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