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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
48
- 英文名:
Recombinant Fibroblast Growth Factor 9 (FGF9)
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20度
- 规格:
10µg50µg 200µg 1mg 5mg
| 产品名称 | 牛成纤维细胞生长因子9(FGF9)重组蛋白 |
| 货号 | LZ-D7076 |
| 规格 | 10µg50µg 200µg 1mg 5mg |
| 物种 | Bos taurus; Bovine (Cattle,牛) |
英文别名:GAF; HBFG9; Glia-Activating Factor; Heparin-Binding Growth Factor 9
物种:Bos taurus; Bovine (Cattle,牛)
来源:原核表达
宿主:E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位:n/a
预测分子量:-
实际分子量:-(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:N-terminal His Tag
缓冲液成份:磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性状:冻干粉
纯度:> 97%
等电点:-
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10µg50µg 200µg 1mg 5mg
重组蛋白表达体系分析:
(一)原核表达系统
原核表达系统有大肠杆菌表达系统、芽孢杆菌表达系统、链霉菌表达系统。其中最常用的表达系统主要是大肠杆菌表达系统。卡梅德生物通过每年多达400个原核蛋白制备项目的技术积累拥有一套完整的蛋白表达和纯化方案,为客户提供优质服务。
(二)酵母表达系统
酵母是一种真核微生物,其细胞有表达外源蛋白的能力,可以达到一个相当高的胞密度状态,在酵母中表达外源蛋白可以进行翻译后修饰,如磷酸化和糖基化。由于酵母宿主细胞结合了细菌和高阶生物宿主细胞表达系统的优良特性,当外源蛋白未能成功地在大肠杆菌中表达时,它是一个不错的选择。用于外源蛋白表达的酵母菌株包括酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、毕赤酵母和乳酸克鲁维酵母。卡梅德生物拥有丰富的酵母蛋白重组表达、发酵和纯化经验,能够快速为不同客户定制酵母表达策略。
(三)昆虫细胞表达系统
膜蛋白、大分子质量蛋白和蛋白激酶这些很难用细菌表达系统表达的蛋白,在Sf9或High-5等昆虫细胞中实现了表达。在大多数昆虫细胞表达系统中,外源基因通过杆状病毒载体转染宿主细胞,含有目标基因的标记盒通过同源重组并入宿主基因组中。卡梅德生物可以提供纯度高达95%的全长膜蛋白定制产品,免费对客户提供的基因进行序列分析,据Sf9,Sf21,Hi-5及S2昆虫细胞的密码子偏爱性,免费为您进行密码子优化,从而有效提高重组蛋白表达量。
(四)哺乳动物细胞表达系统
当含有复杂二硫键或翻译后修饰的靶蛋白不能使用其他表达系统表达时,哺乳动物细胞可表达外源蛋白。常用的外源蛋白表达的哺乳动物细胞系包括海拉(Hela)细胞、人胚肾细胞(HEK293)和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)。卡梅德生物建立了完善的哺乳表达体系,包括但不限于FreeStyle 293-F cell line和Expi CHO-S等细胞系,配合卡梅德设计的高表达载体(含有全长的CMV启动子以及优化后的分泌信号肽序列),能够为客户提供更高表达水平的重组蛋白哺乳动物细胞表达与制备。
| CLIAKitforMouseeosinophilcationicprotein,ECPELISAKit小鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白规格:48T/96T | SRFBP1重组人 SRFBP1 蛋白 (His & GST 标签) Protein |
| 体液环氧化酶(CYCLOOXYGENASE-1)活性荧光定量检测试剂盒20次 | COLEC12 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CLP1 / COLEC12 蛋白 (His 标签) |
| ELISAKitCTX-Ⅰ人Ⅰ型胶原C端肽规格:48T/96T | 白介素2受体β(IL2Rβ)重组蛋白 Recombinant Interleukin 2 Receptor Beta (IL2Rb) |
| 大鼠花生四烯酸-5-脂加氧酶(ALOX5)ELISA试剂盒 ,英文名: ALOX5 ELISA Kit | CD55重组小鼠 CD55 / DAF 蛋白 (His 标签) Protein |
| Rat procollagen I carboxy terminal peptide (P I CP) ELISA Kit 大鼠Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)ELISA试剂盒 | CST1 Protein Human 重组人 Cystatin SN / CST1 蛋白 (His 标签) |
| HumanHirudin,HRDELISA试剂盒人水蛭素(HRD)ELISA试剂盒规格:96T/48T | REG3A Protein Human 重组人 REG3A / HIP 蛋白 (His 标签) |
| 组织还原型谷胱甘肽(GSH)浓度高效液相色谱定量检测试剂盒50次 | VTN重组人 VTN / Vitronectin 蛋白 (His 标签) Protein |
| HumanL-SelectinELISAKit人L选择素(L-Selectin/CD62L)ELISA试剂盒规格:96T/48T | TSPAN7 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 TALLA-1 / TSPAN7 蛋白 (His 标签) |
| 人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1(AIL-R1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 | BMPR1B Protein Human 重组人 BMPR1B / ALK-6 蛋白 (Fc 标签) |
| Human apolipoprotein H (Apo-H) ELISA Kit 人载脂蛋白H(Apo-H)ELISA试剂盒 | ING1/p33(inhibitor of growth gene 1 0.5mgING1/p33(inhibitor of growth gene 1) 生长抑制因子基因1抗原 |
| 可溶性白细胞抗原G(sHLA-G)ELISA试剂盒 ,英文名: sHLA-G ELISA Kit | IL5重组小鼠 IL5 蛋白 (His 标签) Protein |
| RatDopamineD1receptor,D1RELISA试剂盒大鼠多巴胺D1受体(D1R)ELISA试剂盒规格:96T/48T | 白介素16(IL16)重组蛋白 Recombinant Interleukin 16 (IL16) |
| Humangrowth-regulatedoncogeneγ/melanomagrowthstimulatingactivity,GROγ/MGSAELISAKit人生长调节致癌基因γ/黑素瘤生激因子(GROγ/CXCL3/MGSA)ELISA试剂盒规格:96T/48T | DPP10重组人 DPP10 / DPRP3 蛋白 (His 标签) Protein |
| Humandermato-poin,DPTELISA试剂盒人皮肤蛋白(DPT)ELISA试剂盒规格:96T/48T | 牛成纤维细胞生长因子9(FGF9)重组蛋白TNFSF4重组食蟹猴 OX-40L / TNFSF4 蛋白 (Fc 标签) Protein |
| 鸡钙调0酸酶(CaN)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 | SERPINB6B Protein Mouse 重组小鼠 Serpinb6b 蛋白 (His 标签) |
IPTG浓度
有可能,宿主中的蛋白表达将通过lac操纵子系统操作。这个系统的详细解释可以在别处找到,你加入异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),一种乳糖类似物,控制蛋白的表达。蛋白的表达应处于生长的对数期,即当溶液的波长600(OD 600)处的光密度达到0.4-0.6。 如果你的目标是可溶性蛋白质,最好不要改变细胞中蛋白的折叠功能。已经假定不溶性蛋白可能是由于分子伴侣的存在。因此,使用高浓度的IPTG(> 1mM)可能不总是产生的结果。尝试几个不同的浓度,看看哪一个给你最高的可溶性蛋白的产量。
温度
偶尔,你可以在37°C的典型温度下,通过生长和诱导分离可溶性形式的蛋白质,但通常情况下,溶解度在较低温度下增强。可尝试在30°C,25°C和18°C下进行诱导。 注意:如果首先在37℃生长,先让培养物冷却到诱导温度,再加入IPTG。
诱导时间
更长并不总是更好。对于对宿主有毒的蛋白尤其如此。在诱导期间,每隔几个小时取样,并检查目的蛋白的表达。典型的诱导时间根据温度而变化:对于37℃,尝试4小时;对于30℃,进行5-6小时,并且任何低于25℃的温度应该允许生长过夜。
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文献和实验去除方法是基于白蛋白和 Cibachron 蓝色染料的结合。AlbuminOUT™被优化从样本中去除人的白蛋白。AlbuminOUT™使用快速离心柱方法,每个柱子含有 0.2 ml 的染料结合树脂,从而可以结合大于 2 mg 的人白蛋白。AlbuminOUT™可以从 5-50 微升人血浆中去除大于 98% 的白蛋白。 离心柱形式可以在 10 分钟内去除白蛋白。高结合力的蓝色染料结合树脂可以从人,猪,羊,狗,兔,大鼠和牛样本中达到瞬间的结合和去除白蛋白。AlbuminOUT™或许
基系统是专为促进CHO细胞重组蛋白的表达和下游反应而合成的。这种培养方法不需要任何动物来源的成分即可支持高密度的培养。其中的极低水平的重组蛋白有助于下游的纯化和调节。 应用:CHO细胞内重组蛋白的表达 ⑺UltraMDCKTM培养基 UltraMDCKTM培养基是一种无血清限定培养剂,适于高/低平板密度培养MADIN-DABBY犬肾细胞(MDCK)。该培养基只添加了两种蛋白-重组的人胰岛素和牛转铁蛋白,因此蛋白含量极低。经UltraMDCKTM培养基培养的MDCK细胞较在含血清基中培养
。 ⑹ProCHOTMCDM系统 ProCHO限定培养基系统是专为促进CHO细胞重组蛋白的表达和下游反应而合成的。这种培养方法不需要任何动物来源的成分即可支持高密度的培养。其中的极低水平的重组蛋白有助于下游的纯化和调节。 应用:CHO细胞内重组蛋白的表达 ⑺UltraMDCKTM培养基 UltraMDCKTM培养基是一种无血清限定培养剂,适于高/低平板密度培养MADIN-DABBY犬肾细胞(MDCK)。该培养基只添加了两种蛋白-重组的人胰岛素和牛
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