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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
25
- 英文名:
Recombinant Chemokine (C-X-C Motif) Ligand 14 (CXCL14)
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20度
- 规格:
10µg50µg 200µg 1mg 5mg
| 产品名称 | 小鼠趋化因子配体14(CXCL14)重组蛋白 |
| 货号 | LZ-D6899 |
| 规格 | 10µg50µg 200µg 1mg 5mg |
| 物种 | Mus musculus (Mouse,小鼠) |
英文别名:BRAK; SCYB14; BRAK; NJAC; Bolekine; Kec; MIP2-G; MIP2g; BMAC; KS1; Breast And Kidney Expressed Chemokine; Small Inducible Cytokine Subfamily B(Cys-X-Cys)Member 14
物种:Mus musculus (Mouse,小鼠)
来源:原核表达
宿主:E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位:Secreted
预测分子量:13.3kDa
实际分子量:-(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Ser23~Glu99 (Accession # Q9WUQ5) with
缓冲液成份:磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性状:冻干粉
纯度:> 95%
等电点:10.0
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10µg50µg 200µg 1mg 5mg
重组蛋白表达体系分析:
(一)原核表达系统
原核表达系统有大肠杆菌表达系统、芽孢杆菌表达系统、链霉菌表达系统。其中最常用的表达系统主要是大肠杆菌表达系统。卡梅德生物通过每年多达400个原核蛋白制备项目的技术积累拥有一套完整的蛋白表达和纯化方案,为客户提供优质服务。
(二)酵母表达系统
酵母是一种真核微生物,其细胞有表达外源蛋白的能力,可以达到一个相当高的胞密度状态,在酵母中表达外源蛋白可以进行翻译后修饰,如磷酸化和糖基化。由于酵母宿主细胞结合了细菌和高阶生物宿主细胞表达系统的优良特性,当外源蛋白未能成功地在大肠杆菌中表达时,它是一个不错的选择。用于外源蛋白表达的酵母菌株包括酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、毕赤酵母和乳酸克鲁维酵母。卡梅德生物拥有丰富的酵母蛋白重组表达、发酵和纯化经验,能够快速为不同客户定制酵母表达策略。
(三)昆虫细胞表达系统
膜蛋白、大分子质量蛋白和蛋白激酶这些很难用细菌表达系统表达的蛋白,在Sf9或High-5等昆虫细胞中实现了表达。在大多数昆虫细胞表达系统中,外源基因通过杆状病毒载体转染宿主细胞,含有目标基因的标记盒通过同源重组并入宿主基因组中。卡梅德生物可以提供纯度高达95%的全长膜蛋白定制产品,免费对客户提供的基因进行序列分析,据Sf9,Sf21,Hi-5及S2昆虫细胞的密码子偏爱性,免费为您进行密码子优化,从而有效提高重组蛋白表达量。
(四)哺乳动物细胞表达系统
当含有复杂二硫键或翻译后修饰的靶蛋白不能使用其他表达系统表达时,哺乳动物细胞可表达外源蛋白。常用的外源蛋白表达的哺乳动物细胞系包括海拉(Hela)细胞、人胚肾细胞(HEK293)和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)。卡梅德生物建立了完善的哺乳表达体系,包括但不限于FreeStyle 293-F cell line和Expi CHO-S等细胞系,配合卡梅德设计的高表达载体(含有全长的CMV启动子以及优化后的分泌信号肽序列),能够为客户提供更高表达水平的重组蛋白哺乳动物细胞表达与制备。
| 人嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)ELISA检测试剂盒HumanEotaxin1ELISAKit 96T/48T | GPA33重组小鼠 GPA33 / Glycoprotein A33 蛋白 (His 标签) Protein |
| 猪弓形虫(TOX)核酸检测试剂盒 48T | FLRT2 Protein Human 重组人 FLRT2 蛋白 (His 标签) |
| CLIAKitforNAELISAKit大鼠去甲规格:48T/96T | KDR重组人 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 蛋白 (His & GST 标签) Protein |
| 体液α-淀粉酶活性CNPG3比色法定量检测试剂盒50次 | CD7 Protein Rat 重组大鼠 CD7 蛋白 (Fc 标签) |
| ELISAKitE-Selectin/CD62E人E选择素规格:48T/96T | ANGPTL2/ANG-2 (Angiopoietin-like Protein 2 0.5mgANGPTL2/ANG-2 (Angiopoietin-like Protein 2) 血管位蛋白样2/血管生成素样蛋白-2(多肽) |
| Humanepstein-barrvirusIgG,EBvIgGELISA试剂盒人EB病毒IgG(EBvIgG)ELISA试剂盒规格:96T/48T | CD200R1 Protein Human 重组人 CD200R1 / CD200R 蛋白 (His 标签) |
| 组织ROCK激酶总活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次 | GHRH重组人 GHRH 蛋白 (Fc 标签) Protein |
| HumanovalbuminspecificIgG,OVAsIgGELISAKit人卵清蛋白特异性IgG(OVAsIgG)ELISA试剂盒规格:96T/48T | PTPN1 Protein Human 重组人 PTP1B / PTPN1 蛋白 (His 标签) |
| 兔子促甲状腺素(TSH)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 | XIAP(X-linked Inhibitor of Apoptosis Protein 0.5mgXIAP(X-linked Inhibitor of Apoptosis Protein) X-连锁凋亡蛋白/性连锁凋亡抑制蛋白抗原 |
| Human angiotensinase (Angiotensinase) ELISA Kit 人血管紧张肽酶(Angiotensinase)ELISA试剂盒 | 非变性非还原性蛋白上样缓冲液(5X) 1ml*2 |
| 膜联蛋白Ⅵ(ANX-Ⅵ)ELISA试剂盒 ,英文名: ANX-Ⅵ ELISA Kit | NMNAT1重组人 NMNAT1 / NMNAT 蛋白 (His 标签) Protein |
| Ratadiponectin,ADPELISA试剂盒大鼠脂联素(ADP)ELISA试剂盒规格:96T/48T | SPAG5/map126 相关抗原5(多肽抗原 0.5mgSPAG5/map126 相关抗原5(多肽抗原) |
| Humandeoxypyridinoline,DPDELISAKit人脱氧酚/脱氧啉(DPD)ELISA试剂盒规格:96T/48T | IL10RB Protein Human 重组人 IL10Rb 蛋白 (His & Fc 标签) |
| Humancarcinoembryonicaign,CEAELISA试剂盒人癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA试剂盒规格:96T/48T | 小鼠趋化因子配体14(CXCL14)重组蛋白PRLR重组人 PRLR / Prolactin Receptor 蛋白 (His 标签) Protein |
| 犬促卵泡素(FSH)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 | 整合素α3(ITGα3)重组蛋白 Recombinant Integrin Alpha 3 (ITGa3) |
IPTG浓度
有可能,宿主中的蛋白表达将通过lac操纵子系统操作。这个系统的详细解释可以在别处找到,你加入异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),一种乳糖类似物,控制蛋白的表达。蛋白的表达应处于生长的对数期,即当溶液的波长600(OD 600)处的光密度达到0.4-0.6。 如果你的目标是可溶性蛋白质,最好不要改变细胞中蛋白的折叠功能。已经假定不溶性蛋白可能是由于分子伴侣的存在。因此,使用高浓度的IPTG(> 1mM)可能不总是产生的结果。尝试几个不同的浓度,看看哪一个给你最高的可溶性蛋白的产量。
温度
偶尔,你可以在37°C的典型温度下,通过生长和诱导分离可溶性形式的蛋白质,但通常情况下,溶解度在较低温度下增强。可尝试在30°C,25°C和18°C下进行诱导。 注意:如果首先在37℃生长,先让培养物冷却到诱导温度,再加入IPTG。
诱导时间
更长并不总是更好。对于对宿主有毒的蛋白尤其如此。在诱导期间,每隔几个小时取样,并检查目的蛋白的表达。典型的诱导时间根据温度而变化:对于37℃,尝试4小时;对于30℃,进行5-6小时,并且任何低于25℃的温度应该允许生长过夜。
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文献和实验表面电荷与形状、与配体相互作用界面以及构象变化。这些特征为我们了解功能作用模型和生理与病理机制提供了可能。基于上述结构特征,我们可以提出假说性的分子机制,然后基于结构分析的突变与野生型对比,我们可以对机制进行修正和完善。具体来说,我们可以对突变型和野生型进行生化分析(活性及相互作用);细胞学分析(活性及相互作用对定位及细胞表型影响);遗传学分析(果蝇或小鼠表型变化及相关信号通路)。
用的方法之一,是亲和层析法,借助标签和配体的亲和力进行蛋白纯化。纯化的重组蛋白通常能以特异性的方式被洗脱,例如,在 Strep 标签蛋白纯化中,加入生物素(biotin)即可断开 Strep 标签与配体 Strep-Tactin 的作用,达到有效洗脱的目的。得到高纯度有活性的蛋白质应用在多种下游实验中,如研究蛋白质间相互作用等。 那么是否可以以此为基础,将标签配体亲和力加以利用,结合免疫识别特性,用温和的方法得到高纯度的目的细胞呢? 1、「画龙点睛」的表位标签——Fab-Streps 抗体
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