冻存盒，纸质，49格，适用于5ml冻存管

养细胞就跟养娃一样，过来人告诉你几点经验

方面对某些细胞（如 HBE4-E6/E7 肺上皮细胞）的毒性也过大。对于这些细胞，则应使用甘油。甘油可以通过高压蒸汽灭菌，而 DMSO 只能通过过滤除菌。DMSO 或者甘油至少应达到试剂级（或者更高级别，如细胞培养级），并且分装，避光保存。 3 细胞冻存的速率有很多方法可以实现 1℃/min 的降温速度。电脑控制的可编程电子降温系统是最好的方式，可以精确保持降温速度。这也是 ATCC 唯一采用的方法。但这种设备价格较高。比较经济的方式是将冻存管放置于冻存盒中，在低于 –70℃ 的冰箱中冻存 24 小时。已有

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。 (2)取少许混合液(约15 μl)自血球计数盘chamber上方凹槽加入，盖上盖玻片，于100倍倒立显微镜下观察，活细胞不染色，死细胞则为蓝色(或红色-Erythrosin bluish)。 (3)计数四个大方格之细胞总数，再除4，乘以稀释倍数(至少乘以2，因与trypanblue等体积混合)，最后乘以104，即为每 ml中细胞悬浮液之细胞数。若细胞位于线上，只计上线与右线之细胞(或计下线与左线之细胞)。 注：4大格细胞总数×稀释倍数×

干细胞的冻存方法与细胞计数

,CoulterElectronics)。 3、步骤： (1)取50μl细胞悬浮液与50μl trypan blue(orErythrosinbluish)等体积混合均匀于1.5ml小离心管中。 (2)取少许混合液(约15μl)自血球计数盘chamber上方凹槽加入，盖上盖玻片，于100倍倒立显微镜下观察，活细胞不染色，死细胞则为蓝色(或红色-Erythrosin bluish)。 (3)计数四个大方格之细胞总数，再除4，乘以稀释倍数(至少乘以