可立冻存管，4.5ml，内旋，无菌

细胞培养从头学——入门篇

型胶原酶分子颗粒比胰酶大，不容易过滤，因此可以用蔡式滤器过滤除菌。分装入10ml小瓶-20℃保存。 （十一）明胶溶液 因为明胶难于过滤，所以配制0.1%明胶溶液必须用无菌的PBS配制。所以制备过程中必须要注意无菌操作。首要的问题是如何无菌准确称量0.1克（配成100ml溶液）-即解决无菌分装药品的问题。其次要注意即使是0.1的溶液，明胶也难溶，因此要充分摇匀，过夜放置，然后无菌分装入50ml小瓶中， 4℃保存。 （十二）其他培养用液的配制： 20ug/ml

细胞培养的操作步骤

)，在冻存前1d换液。 （2）按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达5×107／ml左右密度，离心，去上清。 （3）加入配制好的冻存液（培养液6.8ml，小牛血清2ml，DMSO 1ml，5.6%NaHCO3 0.1ml），按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10％二甲基亚砜(DMSO) 或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外。 （4）分装于无菌冻存管中，每管加1.5m悬液。 （5）旋好冻存管并仔细

全新发布：外泌体样本收集指南（2026 版）

。 6、组织块 1）切取新鲜的组织块 0.5-1 g 左右，若为临床样本则按实际大小收集，装入样本冻存管中，若体积较大，需用手术刀或手术剪分割后保存； 2）-80℃ 冰箱中保存； 3）填写样本登记单，记录样本名称、类型、编号、取样日期、样本处理过程等情况。 7、脑脊液 1）收集脑脊液 10 mL，样本一经分离，请务必立即置于冰上或 4℃ 短暂保存（不得超过 4 h）, 避免受到血液污染； 2）300 g，4°C，离心 10 min，去除细胞等杂质； 3）3000 g，4°C，离心 15 min，去除细胞