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北京云肽生物科技有限公司
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北京中杉金桥生物技术有限公司建有专业的免疫组化实验室、分子病理实验室,2016年成为中国医学装备协会病理装备分会 shou jia 认证的免疫组化专项培训基地和分子病理培训基地。长期以来,公司积极参加病理行业协(学)会、认真落实行业政策,成为具有行业责任感和社会责任感的企业。公司获得中国医疗器械行业协会病理专业委员会、中国医学装备协会病理装备分会和北京肿瘤病理精准诊断研究会常务理事会员单位。
未来,我们将继续弘扬“立德、敬业”的企业精神,以高度的社会责任感和使命感,开拓创新、锐意进取。坚持以科学发展观为指导,以解决客户需求为目标,全心全意为用户提供 zui you 质的产品和服务。
中杉金桥 ISH-7001 EBER检测试剂盒(原位杂交法),产品简介:
产品品牌:中杉金桥
产品货号:ISH-7001
产品名称:EBER检测试剂盒(原位杂交法)
产品规格:50测试/盒
中杉金桥 ISH-7001 EBER检测试剂盒(原位杂交法),产品说明:
分类: 分子病理
子分类: 原位杂交( di gao xin 标记)
规格: 50测试/盒,100测试/盒,300测试/盒
检验方法: 1、 检验所需仪器、设备:移液器、恒温箱、杂交仪、计时器、孵育盒、染色架、盖玻片、光学显微镜、洗瓶。
2、 试剂准备:
a) DAB显色液需要在使用前配制。配制方法:在小试管中按 20 倍稀释比例依次加入 DAB 底物缓冲液及 DAB 浓缩显色液(棕褐色液体)混匀。配置好的 DAB 显色液 2~8℃避光存放,24小时内有效。
b) PBS 缓冲液需要先配制成溶液,再加入 0.01%体积的 Tween-20(1L 约加入2~3滴)。
3、 操作程序
a) 脱蜡
石蜡切片置于新鲜脱蜡液中,浸泡10分钟×3 次;去除多余的液体后,置于无水乙醇中,浸泡3分钟×3次;经空气干燥5~10分钟。
b) 封闭
空气干燥后的组织,根据大小,滴加 80~100uL封闭液,室温避光孵育10分钟,纯水洗去封闭液后,梯度乙醇脱水(75%,95%。100%各2分钟),空气干燥。
c) 酶处理
空气干燥后的组织,根据大小,滴加 80~100uL胃酶工作液,37℃孵育,根据不同组织类型及切片厚度调整孵育时间5~30分钟。弃去胃酶工作液后,梯度乙醇脱水(75%,95%,100%各2分钟),空气干燥。
d) 滴加探针或空白对照试剂
根据组织大小,组织上滴加5~10uL di gao xin 标记的EBER探针或空白对照试剂,加硅化盖玻片,橡胶水泥封边。37℃杂交孵育2~4小时或过夜(原位杂交仪内或湿盒内)。
e) 去除杂交盖玻片
小心去除橡胶水泥,将玻片浸入PBS缓冲液内10分钟,盖玻片自然滑落(期间提拉玻片数次促进盖玻片滑落)。阻水笔画圈。PBS缓冲液冲洗2分钟×3次。
f) 滴加HRP标记抗 di gao xin 抗体
根据组织大小,滴加30~50uL HRP标记抗 di gao xin 抗体,37℃孵育30分钟;PBS缓冲液冲洗2分钟×3次。
g) DAB显色
根据组织大小,加入适量新鲜配制的DAB显色液,室温孵育5~10分钟,注意镜下观察显色情况。
h) 复染
自来水冲洗,苏木素染色液复染5~10秒;分化、冲洗返蓝。
i) 脱水、透明、封片。
j) 阅片,阳性染色定位于细胞核。
4、 结果判定,染色结果须由有资质的病理医生对染色后的组织片在光学显微镜下观察并进行判读。
预期用途: 用于原位杂交细胞组织上的核酸靶点的检测。
产品订购信息:
ISH-7001 中杉金桥 EBER检测试剂盒(原位杂交法) 50测试/盒
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的细胞和组织切片上滴加PCR反应液,然后把载玻片放入热循环仪中进行扩增,最后通过标记的探针进行原位杂交检测扩增产物。 初步应用 有关原位PCR技术应用成功的第一篇报道是对感染绵羊中枢神经系统visna病毒在绵羊脉络从一细胞中检查,通过PCR扩增,仅用150碱基对的短探针就可通过ISH检查到了细胞内的visna病毒。从开始在试管内细胞行PCR扩增后再涂片做ISH(原位杂交)检查,已发展到用福尔马林固定、石蜡切片的常规病理组织方法做原位PCR检查。有传统的标记探针的原位PCR法(间接法),也有将标记物先
原位杂交(ISH)是一种可在细胞涂片、组织切片以及分裂中期染色体带中检测DNA或RNA的技术,此方法原理是由DNA或RNA的序列与互补的标记单链DNA/RNA探针结合形成标记的双链杂交分子,本技术可对组织细胞原位的待测核酸分子进行定性,定量及定位分析。在细胞分化调节、基因定位、肿瘤遗传学、分子病理学、病毒学等领域得到广泛应用。经典的原位杂交技术包括载玻片处理,组织细胞的固定,探针的制备或选购,原位杂交,洗涤以及检测,其中探针制备技术不属于本章专业
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