- ￥105 - 19995
- 翌圣生物（Yeasen）
- 10154ES03
- 上海
- 2026年02月10日
企业认证
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![高保真DNA聚合酶 Hieff Canace® Gold High-Fidelity DNA Polymerase [可申请试用]](https://img1.dxycdn.com/2023/0128/447/9063203028871186953-14.jpg!wh200)
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
充足
- 英文名：
2×Hieff Canace® Plus PCR Master Mix(With Dye)
- 保质期：
-25~-15℃保存
- 供应商：
翌圣生物科技（上海）股份有限公司
- 保存条件：
-20度
- 规格：
100 μL(10154ES01)/1mL(10154ES03)/5×1mL(10154ES08)/100×1mL(10154ES60)/100 mL(10154ES61)
| 规格： | 100 μL(10154ES01) | 产品价格： | ￥105.00 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 1mL(10154ES03) | 产品价格： | ￥585.00 |
| 规格： | 5×1mL(10154ES08) | 产品价格： | ￥1655.00 |
| 规格： | 100×1mL(10154ES60) | 产品价格： | ￥19995.00 |
| 规格： | 100 mL(10154ES61) | 产品价格： | ￥19995.00 |
产品简介
2×Hieff Canace® Plus PCR Master Mix (With Dye)是即用型2×预混合溶液，包含Hieff Canace® Plus High-Fidelity DNA Polymerase，dNTPs以及优化的缓冲体系。预混液中添加了常温可抑制聚合酶活性和3’→5’核酸外切酶活性的两种单克隆抗体，可简便地进行高特异性的Hot Start PCR。预混液中添加了延伸因子使得该酶具有长片段扩增能力，扩增目的片段的长度可长达13 kb，该酶具有5’→3’DNA聚合酶活性和3’→5’核酸外切酶活性，其保真性是Taq DNA聚合酶的83倍，是普通Pfu DNA聚合酶的9倍。适用于复杂模板的扩增，扩增产物为平末端。
2×Hieff Canace® Plus PCR Master Mix (With Dye)具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点，反应体系只需加入引物和模板即可，并可以通过两步法的程序进行扩增，简化了实验步骤，节省了时间。本产品中含有电泳指示染料，PCR产物可直接进行电泳。另外，该产品还含有特异保护剂，使得预混液反复冻融后仍可维持稳定活性。
产品信息
| 货号 | 10154ES01 / 10154ES03 / 10154ES08/10154ES60 |
| 规格 | 100 μL / 1 mL / 5×1 mL/100×1 mL |
储存条件
-25~-15℃保存，有效期1年。
使用说明
- 推荐PCR反应体系
| 组分 | 体积（μL） | 终浓度 |
| RNase-free ddH2O | to 50 μL | - |
| DNA模板*** | 适量 | - |
| Forward Primer (10 μM)** | 2 μL | 0.4 μM |
| Reverse Primer (10 μM)** | 2 μL | 0.4 μM |
| 2×Hieff Canace® Plus PCR Master Mix (With Dye)* | 25 μL | 1× |
*在终浓度1×预混液含有1 U/50 μL的聚合酶、2 mM Mg2+和200 μM的dNTPs。
** PCR反应体系中引物终浓度的范围为0.2-1 μM，推荐0.4 μM。
***不同模板的推荐使用量（25 μL反应体系）:
| 模板种类 | 扩增片段1 kb-10 kb |
| 基因组DNA | 50 ng-200 ng |
| 质粒或病毒DNA | 10 pg-20 ng |
| cDNA | 1-2.5 μL（不超过PCR反应总体积的1/10） |
- 推荐PCR扩增程序
- 两步法程序(优先推荐)
| 循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 98℃ | 3 min | 1 |
| 变性 | 98℃ | 10 sec | 30-35 |
| 延伸 | 68℃ | 30 sec/kb | |
| 终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
2）三步法程序(常规程序)
| 循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性* | 98℃ | 3 min | 1 |
| 变性 | 98℃ | 10 sec | 30-35 |
| 退火** | 60℃ | 20 sec | |
| 延伸*** | 72℃ | 30 sec/kb | |
| 终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
*预变性温度和时间：推荐温度：98°C，时间：3 min，高GC含量模板5-10 min。
**退火温度和时间：推荐温度：60°C，也可根据需要，设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度。推荐退火时间设置为20 sec，可以在10-30 sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。
***延伸温度和时间：推荐温度：72°C。时间：30 sec/kb，复杂模板根据实际情况可延长至60 sec/kb。
3）梯度温度退火程序(难扩增基因推荐程序)
| 循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 98℃ | 3 min | 1 |
| 变性 | 98℃ | 10 sec | 15，每个循环降低1℃ |
| 梯度退火 | 70-55℃ | 20 sec | |
| 延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | |
| 变性 | 98℃ | 10 sec | 20 |
| 正常退火 | 55℃ | 20 sec | |
| 延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | |
| 终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
4）不同扩增程序下的特点
| 程序类型 | 两步法 | 三步法 | 梯度退火 |
| 速度 | 最快 | 中等 | 慢 |
| 特异性 | 高 | 中等 | 高 |
| PCR产量 | 中等 | 最高 | 中等 |
| 检出率 | 高 | 中等 | 高 |
注意事项
1. 本产品仅作科研用途。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
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文献和实验，切除标签，并通过质谱仪检测。如果你们实验室没有质谱仪，而又想开展多重分析，那么下面的一些方案可能适合你。 罗氏应用科学部的Light Cycler 480 Probes Master Mix能成功支持4重反应，甚至达到5重。这是一种即用型的反应预混液，包含了FastStart Taq 热启动型DNA聚合酶，它能减少非特异产物的形成，从而显著改善PCR的特异性和灵敏度。 Bio-Rad的iQ Multiplex Powermix能检测最多4个目标，即使它们的表达量相差106倍
PCR 新手指南——手把手教您如何正确选择合适的 PCR 酶
酶。 图 1.非特异性扩增（左图）与使用热启动 DNA 聚合酶进行的特异性扩增（右图）。 如何为您的 DNA 聚合酶选择正确的形式 还有更多需要考虑的因素。选择可以简化您工作流程的聚合酶形式。PCR 聚合酶形式的选择包括即用型预混液、用于直接凝胶上样的含染料缓冲液以及用于直接 PCR 分析的所有必要成分的完整试剂盒。 使用预混液，您只需添加模板和引物，然后，开始 PCR 实验。如果您想进一步减少操作步骤，使用含染料缓冲液的聚合酶允许 PCR 产物直接凝胶上样（注意：确保染料与下游应用兼容）。直接
扩增曲线的分析攻略。 1、确认软件设置是否正确 对照试剂盒说明书，检查时间、温度、循环数、荧光采集等是否设置正确。有一个比较容易忽略的设置问题是，需要看下所选用的试剂中是否含有 ROX 来作为参比荧光染料。Applied Biosystems™ 系列荧光定量 PCR 仪器可以用 ROX 来作为参比荧光染料，用以校正仪器系统以外的物理误差，比如均一化校正由于移液误差或者蒸发导致的批内体积误差等。目前市面上有的的荧光定量 PCR 预混液是不含有 ROX 的，当用此类试剂的时候，应该将 ROX 参比
